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背景和目的：恶性淋巴瘤简称淋巴瘤，可分为霍奇金淋巴瘤（Hodgkinlymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）二大类。NHL又分为B细胞肿瘤、T细胞肿瘤和NK细胞肿瘤。B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）包括前体B细胞肿瘤如B淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤和成熟（外周）B细胞肿瘤，后者类型较多，常见的有弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、滤泡性淋巴瘤(FL)、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤（MALT）、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（CLL/SLL）、套细胞淋巴瘤（MCL）等，约占非霍奇金淋巴瘤的3/4，按照淋巴瘤全身化（generalization）的程度，将其分为低危的惰性淋巴瘤（indolent lymphoma）、中危的侵袭性淋巴瘤（aggressive lymphoma）和高危的高度侵袭性淋巴瘤（highly aggressive lymphoma）三类。组蛋白甲基化是组蛋白修饰的重要方式，其作用主要是维持染色质的结构及调节相应位点的基因表达，甲基化由特异的组蛋白甲基转移酶（histonemethyltransferases, HMTs）催化完成，组蛋白的异常甲基化可使癌基因表达增强，抑癌基因被抑制，导致肿瘤的发生。越来越多的研究证明组蛋白甲基化转移酶在肿瘤发生发展中具有重要作用，HMTs活性缺失或失调可能是导致肿瘤发生的原因之一。NSD2是含有SET结构域的一种组蛋白赖氨酸甲基转移酶，是NSD（nuclear receptor binding SET domain containing）蛋白家族成员之一，其蛋白的SET结构域和H3K36甲基化酶SET2同源，据此可推测出其催化H3K36甲基化。NSD蛋白与疾病的密切联系是人们瞩目的焦点。在成年人中，多种肿瘤与NSD2的高表达密切相关，如染色体易位t(4,14)的多发性骨髓瘤中NSD2呈高表达，而抑制NSD2的表达可以减缓肿瘤细胞的生长速度。EZH2是PcG家族中的一员，是一种在进化上高度保守的基因，是唯一的H3K27甲基化催化酶，其与组蛋白甲基化修饰有关，并且在细胞的生长发育中起到重要作用，在肿瘤发生中较早受到重视。EZH2在多种实体组织肿瘤如前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌等以及相应肿瘤细胞系中高表达，动物实验发现，抑制EZH2活性能阻断小鼠体内肿瘤的生长。在弥漫大B细胞淋巴瘤中，EZH2的一个等位基因发生突变后会出现更强的酶活性。目前关于NSD2和EZH2在B细胞淋巴瘤中的表达研究国内外罕见报道。本课题采用免疫组化及RT-PCR方法分别在蛋白水平和mRNA水平对B-NHL组织中组蛋白甲基转移酶NSD2和EZH2进行检测，探讨二者在B-NHL的表达状况及临床病理意义。材料和方法：1、收集2004年1月-2012年12月大理学院附属医院和大理州人民医院病理科确诊为B细胞非霍奇金淋巴瘤病例的石蜡包埋组织标本共140例，并根据淋巴瘤组织学类型及全身化程度将其分为惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤三组；2、应用免疫组化及RT-PCR方法检测B-NHL组织中NSD2和EZH2表达，并结合临床病理资料进行分析。结果：1、临床基本信息：本组140例B-NHL，男性76例，女性64例，男女之比1.2：1，年龄范围8岁-93岁，中位年龄48岁，其中惰性淋巴瘤15例，侵袭性淋巴瘤100例，高侵袭性淋巴瘤25例。2、NSD2检测结果：（1）免疫组化染色结果：140例B-NHL组织中NSD2的阳性表达率为80.71%（113/140），其中惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤的阳性率分别为66.67%（10/15）、81.00%（81/100）、88.00%（22/25），25例反应性增生淋巴结中NSD2的阳性率为4.00%（1/25）。（2）RT-PCR检测结果：30例B-NHL中NSD2mRNA阳性表达率为80.00%（24/30），其中在惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤中的阳性率分别为70%（7/10）、80%（8/10）、90%（9/10），反应性增生淋巴结中NSD2mRNA阳性率为0（0/10）。综上，NSD2显著表达于B细胞淋巴瘤，与反应性增生淋巴结组织比较，差异有显著性（P=0.000），且蛋白与核酸水平表达状况较为一致；NSD2在惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤中的表达有升高趋势，但无统计学意义（P＞0.05）。3、EZH2检测结果：（1）免疫组化染色示140例B-NHL组织中EZH2阳性表达率为93.57%（131/140），其中惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤中的阳性率分别为93.33%（14/15）、93.00%（93/100）、96.00%（24/25），反应性增生淋巴结中EZH2的阳性率为16.00%（4/25）。（2）EZH2mRNA在B-NHL中阳性表达率为93.33%（28/30），其中在惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤中的阳性率分别为90%（9/10）、90%（9/10）、100%（10/10），在反应性增生淋巴结中的阳性率为10%（1/10）。免疫组化与RT-PVR检测结果表明，EZH2在B-NHL与反应性增生淋巴结组织中表达差异有显著性（P=0.000），且蛋白与mRNA水平表达状况基本一致。结论：1、NSD2显著高表达于B-NHL，反应性增生淋巴结仅表达于滤泡细胞的生发中心，两组之间表达差异有显著性，提示NSD2异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。2、EZH2高表达于B-NHL，低表达或不表达于反应性增生淋巴结，两组之间表达差异有显著性，提示EZH2异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。3、NSD2在惰性、侵袭性、高侵袭性淋巴瘤中的表达有升高趋势，但无统计学意义。4、NSD2和EZH2在B-NHL中蛋白与mRNA水平表达状况基本一致。