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目的:将马鹿茸、淫羊藿、马鹿骨和槐角组成复方中药鹿茸骨宝,研究其最佳提取工艺以及增加骨密度的作用,以期开发出工艺优良、安全稳定具有增加骨密度功效的保健食品。方法:1.提取工艺研究:采用L9(34)正交实验法,对鹿茸骨宝进行提取工艺的研究。采用高效液相色谱法(HPLC)测定淫羊藿苷含量,以淫羊藿苷转移率为考察指标,对影响淫羊藿和槐角的水提取因素:加水倍数、提取次数和提取时间,进行考察;采用凯氏定氮法测定总氮含量,以总氮含量为考察指标,对影响马鹿骨的水提取因素进行考察,确定最佳提取工艺。2.功效性成分及标志性成分含量测定:应用紫外-可见分光光度法测定鹿茸骨宝功效性成分总黄酮的含量。采用HPLC测定鹿茸骨宝中标志性成分淫羊藿苷的的含量并进行方法学考察。3.对成骨细胞的作用研究:采用MTT法测定鹿茸骨宝对MC3T3-E1细胞的增殖作用、对H2O2损伤MC3T3-E1细胞的保护作用。测定鹿茸骨宝对MC3T3-E1细胞分化的影响。4.对去势大鼠骨质疏松模型的作用研究:应用去势大鼠模型,连续灌胃给药12周,检测鹿茸骨宝对大鼠血钙、骨钙和骨密度的影响。采用单光子X线骨密度仪测定骨密度值;原子吸收法测定骨钙含量。结果:1.提取工艺研究:淫羊藿、槐角的最佳提取工艺为加10倍量水,煎煮3次,每次1.5h;鹿骨的最佳提取工艺为加12倍量水,煎煮4次,每次6h。2.功效性成分及标志性成分含量测定:功效性成分总黄酮的含量为21.08mg/g,标志性成分淫羊藿苷的含量为5.91mg/g,测定方法准确可行且重复性好。3.对成骨细胞的作用研究:鹿茸骨宝能促进MC3T3-E1细胞增殖,对H202损伤的MC3T3-E1细胞有一定的保护作用,促进MC3T3-E1细胞分化。4.对去势大鼠骨质疏松模型的作用研究:与模型组相比,鹿茸骨宝能显著提高大鼠骨密度、骨钙和血钙值,表明鹿茸骨宝增加骨密度效果明显。结论:本研究制备的鹿茸骨宝保健品制备工艺方便可行,功效性成分明确,含量测定方法专属性强,重复性好,增加骨密度作用显著,安全稳定。