核桃青皮提取物抑菌和抗氧化活性研究

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本研究旨在研究核桃青皮的体外抑菌和抗氧化活性,为核桃青皮废弃物的利用探索新的出路。以细菌G+(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)、G-细菌(大肠杆菌、铜绿假单胞菌)、真菌(白色念珠菌、疫霉菌、青霉菌、绿霉菌)为指示菌,对核桃青皮提取物进行抑菌活性测定。同时,采用福林酚法测定总酚含量、DPPH法测定清除自由基能力、普鲁士蓝法测定还原能力三个方面研究核桃青皮提取物抗氧化活性。  本研究主要内容包括:⑴采用65℃甲醇热回流提取法对核桃青皮进行提取,料液比为1∶15,回流提取2h,连续提取5次,提取率约为20-23%,并用粗提物测定抑菌试验。⑵选用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇对核桃青皮甲醇提取物的溶液进行萃取,不同溶剂萃取物稀释成不同浓度后对8种供试病原菌进行抑菌活性测定,结果表明,随着浓度的增大,各萃取物对不同病原菌的抑制效果随之增大,当浓度为50 mg/mL时,桃青皮甲醇提取物的乙酸乙酯提萃取相和氯仿萃取相对病原细菌的抑制效果最好,石油醚萃取相对病原真菌的抑制效果最好。因此,选用核桃青皮甲醇提取物的石油醚萃取相作进一步的试验。⑶将各萃取相稀释为适当浓度,以福林酚法测定总酚含量,以DPPH法测定清除自由基能力,以普鲁士蓝法测定还原能力,结果显示,乙酸乙酯相和氯仿相的抗氧化能力最强。⑷为了进一步纯化得到核桃青皮中的活性成分,采用柱层析对核桃青皮石油醚萃取物进行分离。以硅胶为吸附剂,选用石油醚和乙酸乙酯不同配比溶液作为洗脱液进行梯度洗脱,薄层层析分析得到个流分,并对每个流分做体外抑菌试验,并发现TLC生物自显影薄层板上有两个明显抑菌活性的位点,其中,根据2号样品理化性质初步定位生物碱类化合物。
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