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目的证明丹参（Salvia miltiorrhiza Bge.）主要成分丹参总酚酸（Total salvianolic acids,Tsa）具有诱导大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞PC12细胞（pheochromocytoma cells,PC12）分化的作用,在此基础上进一步探讨细胞外信号调节激酶（extracellular signal regulated kinase,ERK）及相关蛋白与Tsa诱导PC12细胞分化之间的关系。方法（1）运用噻唑蓝溴盐检测法（MTT assay,MTT）检测0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1浓度的Tsa对PC12细胞是否具有药物毒性,以此来保证后续实验正常进行。（2）检测0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1的Tsa对氧糖剥夺损伤（oxygen and glucose deprivation,OGD）损伤后的PC12细胞有无修复作用,进一步证明Tsa对PC12细胞具有增殖及保护作用。（3）体外培养PC12细胞,观察0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1浓度的Tsa及神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）作用于PC12后,PC12细胞发生的形态变化,并在倒置显微镜下统计PC12细胞生长突起个数的百分比;采用蛋白质免疫印迹法（Western bloting）检测微管相关蛋白（microtubbule-associated protein-2,MAP-2）,ERK1/2,磷酸化ERK1/2（phosphorylated extracellular regulatory kinases,p-ERK）,丝裂原细胞外激酶MEK1/2（mitogen extracellular kinase,MEK）及磷酸化MEK1/2（phosphorylated mitogen extracellular kinase,p-MEK）的表达情况,并观察MEK抑制剂U0126对Tsa 1μg·L-1作用PC12细胞后p-ERK1/2与ERK1/2蛋白的表达。（4）选择Tsa1μg·L-1进行后续促分化实验,采用Western bloting法检测Tsa及NGF作用PC12细胞后,不同时间点ERK1/2及p-ERK1/2蛋白的表达情况。对Tsa 1μg·L-1作用PC12细胞1h,4h,6h,8h,12h,24h后进行MAP-2染色并统计PC12细胞生长突起个数。采用Western bloting法检测不同时间段MEK1/2,p-MEK1/2及Ras蛋白的表达情况,并观察MEK抑制剂U0126及PD184352对1μg·L-1Tsa作用PC12细胞后p-ERK1/2与ERK1/2蛋白的表达;统计MEK抑制剂U0126及PD184352对Tsa 1μg·L-1作用PC12细胞后,细胞生长突起个数的百分比。结果（1）浓度为0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1的Tsa对PC12细胞的增殖率无影响（P<0.01）,证明Tsa对PC12细胞并无药物毒性。（2）此外0.1μg·L-1,1μg·L-1的Tsa可修复OGD损伤后的细胞,细胞增殖率分别上升至（47.7±1.803）%和（63.17±13.04）%。（3）0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1的Tsa均可促进细胞生长突起（P<0.01）;Tsa与NGF一样能够激活MAP-2蛋白。与空白对照组相比,MAP-2蛋白表达较为明显（P<0.01）,并且随着Tsa浓度的增强,p-ERK1/2,p-MEK1/2蛋白的表达也逐渐增强（P<0.01）,并且这种作用可被MEK1/2抑制剂U0126所阻断（P<0.01）。（4）Western bloting检测法显示,50ng·mL-11 NGF作用PC12细胞后,2.5min时p-ERK1/2的表达最明显,而Tsa 1μg·L-1作用细胞1h后,p-ERK1/2蛋白的表达才开始增强;Tsa1μg·L-1作用1h时PC12细胞出现明显突起（P<0.01）,在4h,6h,8h,12h,24h时突起生长个数与1h时持平;p-MEK 1/2蛋白的表达也随着时间的增长而增强（P<0.01）,而Ras蛋白的表达在10min-30min时最强烈（P<0.01）,1h时开始下降;MEK抑制剂U0126及PD184352能够抑制p-ERK1/2蛋白的活化（P<0.01）,且抑制剂作用PC12细胞后,与Tsa 1μg·L-1作用后的细胞相比,突起生长个数明显减少（P<0.01）。结论（1）MTT实验结果表明,0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1的Tsa对PC12细胞并无毒性,且Tsa 1μg·L-1对PC12细胞具有增殖作用。（2）0.1μg·L-1、1μg·L-1的Tsa对OGD模型具有修复作用。（3）Tsa能够诱导PC12细胞分化,且其可能是通过激活p-MEK及p-ERK1/2来促进PC12细胞分化的。（4）Tsa 1μg·L-1作用PC12细胞1h后即会出现生长突起的现象,且其可能是通过激活Ras/MEK1/2/ERK1/2通路来完成的。