组蛋白去乙酰化酶1在人支气管干细胞增殖分化过程中的时空表达 前言 目前,在气管干细胞研究中,我们建立了氟脲嘧啶（Fluorouracil,5-FU）引发离体气管损伤修复模型,论证了气管干细胞位于具有5-FU抗性的G0期细胞中。为阐明气管干细胞增殖分化的调控机制,我们已检测了wnt信号中的wntl,β-catenin,cyclinD1等成员在气管干细胞增殖分化过程中的时空变化情况,证明了Wnt/β-catenin信号传导途径参与调控气管干细胞增殖分化全过程。近来有学者在研究斑马鱼视网膜发育中发现组蛋白去乙酰化酶1（Histone deacetylase 1,HDAC1）促进视网膜干细胞分化成神经元和胶质细胞,提出HDAC1是视网膜干细胞由增殖到分化的开关。那么HDAC1在气管干细胞的增殖分化过程中是否也具有这种开关作用?这在国际上尚无报道。本研究利用免疫组织化学和western blotting方法检测了HDAC1在气管干细胞增殖分化过程中的动态表达情况。 材料和方法 1.制备人支气管损伤模型:在因肺癌肺叶切除组织中取距肺癌组织2cm处支气管（该材料经患者家属及中国医科大学伦理委员会同意）放入无菌袋中在2h内用冰盒运回实验室,无菌PBS反复冲洗,洗净血液和粘液,置于DMEM/F12培养液中（含10%胎牛血清）,剪成约2-3mm的气管环,于倒置显微镜下观察纤毛摆动良好,于培养液中加入终浓度为120mg/ml的5-FU,37℃,5%CO₂孵育12h,弃去上述培养液,换成新鲜DMEM/F12液（含10%胎牛血清）继续培养,于换液后0、3、6、12、24、48h分别取出一组织块,10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,制成4μm厚的组织切片。另于换液后0、3、6、24、48h取气管组织,解剖显微镜下机械剥离上皮,每个样品约