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通过查阅大量文献，确定开展溶栓剂基因克隆与表达及除草剂与旱地植物DNA的相互作用研究，取得了如下成果。 1．纤溶酶原可在溶纤酶激活剂作用下被激活，形成具有生物活性、可催化血栓纤维蛋白水解的纤溶酶，从而消除血栓，治疗疾病。本实验室尝试采用转基因技术，将溶栓剂基因转入植物，利用植物反应器来生产溶栓药物。本论文进行了该项目的前期工作，运用DNA重组技术，将本实验室设计的溶栓剂基因亚克隆于穿梭质粒pBI121中，构建了溶栓剂基因表达载体pBI121-zzq，并将它转化大肠杆菌DH5α。穿梭质粒pBI121含有编码卡那霉素抗性的新霉素磷酸转移酶基因，用含有Km的培养基筛选菌株。从菌株中提取的重组质粒pBI121-zzq用琼脂糖凝胶电泳检测鉴定。在200bp左右有一大小与溶栓剂基因大小相符的条带，表明大肠杆菌转化体中含有溶栓剂的亚克隆质粒。pBI121-zzq转化LBA4404用Str和Km双抗培养基筛选，经琼脂糖电泳实验证实，pBI12l-zzq在农杆菌LBA4404中成功表达，为开发新型药用植物奠定了基础。 2．用紫外分光光度法研究了玉米和狗尾草等旱地植物DNA与除草剂的作用。首先优化了提取DNA的条件。 (1) 采用SDS法提取西红柿(含玉米)DNA。影响提取西红柿(含玉米)DNA的产率和纯度的因素主要有提取液用量、酚／氯仿／异戊醇溶液用量及酚与氯仿／异戊醇的比例、氯仿／异戊醇溶液用量、异丙醇用量以及饱和KCI溶液的用量。实验结果证实，提取西红柿、玉米DNA最优条件为：细胞提取液4.0ml，饱和KCI溶液1.5ml，酚／氯仿／异戊醇溶液为样液体积的0.8倍，其中酚与氯仿／异戊醇的比值为24：25：1，氯仿／异戊醇溶液为样液体积的0.7倍，异丙醇为样液体积的0.9倍。对于富含多糖的狗尾草DNA的最优提取条件为：细胞提取液用量为4.0ml，无水乙醇与样液体积比为1：10，水浴时间为60min，NaAc溶液为1.0ml，酚／氯仿／异戊醇溶液、氯仿／异戊醇溶液和异丙醇均为样液体积的1.0倍，酚／氯仿／异戊醇溶液中酚：氯仿：异戊醇为26：23：1。经琼脂糖凝胶电泳实验证实，西红柿、玉米及狗尾草的DNA均只呈现出一个条带，表明所提取西红柿、玉米及狗尾草的DNA纯度高，没有断裂降解。 (2) 采用紫外光谱法研究了玉米DNA和狗尾草DNA与除草剂苯噻草胺的相互作用。首次揭示苯噻草胺可使DNA双链解链，抑制DNA的复制，从而杀除杂草。苯唆草胺除草的最佳浓度在5.4 x 10，mol/L一1.8 x10，mol/L范围之间;当浓度小于5.4 x 10一o1/L时，苯唾草胺对杂草的DNA没有影响;当浓度大于1.8 x10、o1/L时，苯唆草胺破坏作物的DNA，造成药害。