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口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)是一种常见的口腔粘膜的慢性炎症性疾病，其病因和致病机制目前尚不清楚，大量研究已证实OLP是T淋巴细胞介导的免疫性疾病。 研究表明CD4+T淋巴细胞及其细胞因子在免疫性疾病的发病机制及粘膜免疫应答中起着关键作用。CD4+T淋巴细胞按表达CD45分子异构体的不同可分为抑制诱导亚群(CD4+CD45RA+)和辅助诱导亚群(CD4+CD45RO+)。CD4+CD45RA+T细胞对于成熟T淋巴细胞介导的免疫应答非常重要，它具有激活CD8+T细胞抑制B细胞分泌免疫球蛋白的功能。CD4+CD45RA+T细胞的减少可导致T细胞抑制功能的下降。T细胞介导的抑制在维持自身耐受中起重要作用，其功能降低与自身免疫性疾病的发生有关。 CD4+辅助性T细胞(T helper cell，Th cell)表现为功能上的异质性，在不同的细胞因子、抗原递呈细胞及抗原等因素的作用下，Th0细胞选择性地向Th1或Th2细胞分化。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ、TNF-β，以IFN-γ为主要特征。Th1细胞与细胞介导的免疫应答、巨噬细胞的活化及迟发型超敏反应(DTH)有关。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13，以IL-4最富有代表性。Th2细胞促进抗体的产生，介导体液免疫、B细胞和嗜酸性粒细胞的活化以及IgE的生成。Th1和Th2细胞为一对重要的调节细胞，同时Th1和Th2细胞又互为抑制细胞。Th1／Th2细胞因子比值可反映机体细胞因子的平衡及Th1细胞或Th2细胞的优势状态。Th1／Th2极化(polarization)是免疫应答调节中的关键环节，Th1细胞和Th2细胞的相互平衡直接影响机体的免疫功能，且与疾病状态密切相关。如何纠正失衡的Th1／Th2细胞因子，逆转Th1／Th2的异常漂移，已成为免疫 治疗的新热点。 本实验研究OLP患者外周血淋巴细胞中CD4+CD45RA+T淋巴细胞亚群数量及功能的改变，首次探讨OLP患者的Thl/T hZ免疫应答，并通过观察卡介菌多糖核酸(baeillus Calmette一Guerin polysaeeharide nueleie acid，BCG一pSN)和地塞米松对OLp患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuelear eells，PBMe)IFN- 丫和IL一4的调节作用，探讨BCG一PSN和糖皮质激素对OLP患者Thl/T hZ细胞因子的影响。 本研究分为以下三个部分: 第一部分口腔扁平苔鲜外周血中CD4+CD45RA+T淋巴细胞亚群的变化 随机选择的OLP患者均经病检证实，分为糜烂型和斑纹型，以健康成人作为对照组。分离外周血中的PBMC，用双色免疫荧光双标记染色，应用流式细胞仪检测OLP患者及正常对照组外周血淋巴细胞中CD4+CD45RA十T细胞亚群的数量，结果发现OLP患者CD4+CD45RA+T细胞数量明显低于正常组。 用刀豆蛋白A刺激分离出的淋巴细胞，在370 CS%C02培养箱中培养48小时，检测CD4+CD45RA+T细胞的增殖反应，实验发现OLP患者CD4+CD45RA+T细胞的增殖能力下降，但OLP的糜烂型和斑纹型之间并没有CD4十CD45RA十T细胞数量及增殖能力的差异。 OLP患者CD4+CD45RA+T细胞的数量减少和功能下降，可引起T淋巴细胞抑制功能的降低，而T淋巴细胞抑制功能的降低可引起患者免疫耐受的下降，与自身免疫应答的发生有关。 第二部分口腔扁平苔鲜的Th 1/ThZ免疫应答 采用密度梯度离心法，分离OLP患者和正常对照组外周血中PBMC，在植物血凝素(phytohemagglutinin，PHA)的刺激下，在370 es%eo:培养箱中培养72小时，离心后收集上清液和细胞。采用酶联免疫吸附试验，检测PBMC培养上清液中IFN一Y和IL一4的含量。应用逆转录聚合酶链反应(RT一PCR)技术，检测培养细胞中IFN一Y和IL一4mRNA的表达水平。结果发现OLP患者PBMC培养上清液中IFN一丫的含量明显低于正常对照组，IL一4的含量无显著性差异，IFN一Y/IL一4 II的比值低于对照组。PBMC培养细胞中IFN一丫和IL一4 mRNA的表达水平和上清液中蛋白水平的检测结果相一致。结果说明在OLP中，存在Thl/T hZ的平衡失调，Thl细胞减少，为ThZ细胞占优势的免疫应答。 第三部分卡介菌多糖核酸和地塞米松对口腔扁平苔鲜Thl/Th2细胞因子的调节作用 分离OLP患者外周血中的PBMC，分别用PHA、BCG一PSN和地塞米松刺激培养72h，采用酶联免疫吸附试验和RT一PCR技术，检测培养上清液中IFN一Y和IL一4的含量及mRNA的表达水平。结果发现BCG一PSN可明显增加IFN一Y的水平，但对IL一4的产生无影响，从而提高了IFN一Y/IL一4的比值。地塞米松同时抑制IFN-丫和IL一4的表达，且对IFN一Y的抑制作用较IL一4更为显著，说明BCG一PSN和地塞米松对OLP Thl/T hZ细胞因子具有不同的效应，BCG一PSN可使OLP的ThZ免疫应答向Thl逆转，从而调节OLP的Thl/T hZ免疫失衡。