当今社会,为应对各种逆境,人们已经开始从自然界本身寻找答案。“一个基因一个产业,一粒种子一个世界”代表了当今农业生产的方向。世界各大公司和研究人员着手于寻找优良的基因应对日益增长的高盐、干旱、病害等环境问题。本研究从棉花中克隆出了四个GhMYC转录因子,并进行了生物信息学分析;对实验室已克隆出的三个ERF、三个DREB转录因子基因,过表达于拟南芥中,进行了耐旱耐盐功能分析及筛选;同时对抗草甘膦除草剂基因GR79的抗除草剂能力进行了初步的探究,并取得了以下结果:1.利用电子克隆技术从棉花基因组中预测出四个MYC类转录因子,并通过生物信息学工具对GhMYC1-4基因的DNA序列及所编码的蛋白的结构进行预测。结果表明:蛋白均属于亲水性的不稳定蛋白;有参与细胞信号转导的磷酸化位点;无跨膜区、亚细胞定位于细胞核;具有典型的bHLH-MYC类转录因子所特有的结构。根据电子克隆的基因序列,从棉花的cDNA中克隆出GhMYC1-4四个MYC类转录因子,进行了命名,获取了 GenBank登录号,并申请了发明专利3项。2.将四个GhMYC转录因子基因GhMYC 1-4,三个ERF类转录因子基因HhERF、KcERF、MlERF,三个 DREB 类转录因子基因 PeDREB2a、PeDREB2b、HhDREB构建植物高效表达载体,转化拟南芥,并对转基因植株进行抗逆比较。比较结果发现,MYC类转录因子中的GhMYC1与GhMYC4抗逆效果强;ERF类转录因子中的KcERF的抗逆效果强;DREB类转录因子中的PeDREB2a的抗逆效果强。试验结果为抗旱耐盐转基因作物的培育提供了优良的基因源。3.按照植物对密码子的偏爱,对抗除草剂基因GR79进行密码子优化设计,并添加CTP前导肽序列,并人工合成了适于植物中表达的GR79基因。构建起植物表达载体后用于拟南芥的转化,对转化植株进行草甘膦喷洒实验,确定了适于转基因植株筛选的最佳除草剂浓度为0.15%的41%的草甘膦异丙胺盐溶液。试验结果为抗除草剂基因的应用提供了基础数据。