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目的：本实验基于“肾精和脑髓”藏象理论与缺血性脑卒中“气虚血瘀”病机理论，应用新安名老中医经验治法益气活血法和补肾生髓法及其代表中药复方，研究局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内源性神经干细胞增殖分化Wnt/β-catenin信号通路变化及其调控机制,部分揭示“肾精和脑髓”藏象理论及“气虚血瘀”病机理论物质基础与调控的生物学机制及“补肾生髓法”与“益气活血法”的作用机制，为中风的治疗和康复技术开发以及药物的研究思路与方法提供实验依据。方法：健康雄性SD大鼠136只，随机分为正常组，模型组，补肾生髓法组，益气活血法组，每组又分为再灌注3d、7d2组，每组17只。根据Zea Longa法加以改进建立MCAO/R动物模型。实验一选取大鼠新鲜缺血侧额顶叶皮质，采用基因芯片技术分别检测3d组和7d组MCAO/R大鼠缺血侧额顶叶皮质wnt/β-catenin信号通路基因表达的变化，用ΔΔCt统计方法分析结果。实验二选取大鼠内固定的脑组织，做脑部冠状切片，采用免疫组织化学二步法测定大鼠脑皮质wnt7a和mmp7蛋白的表达，用图像分析系统和SPSS17.0软件处理，两组之间比较用t检验分析结果。结果：1实验一结果基因芯片检测结果显示再灌注3d、7d，MCAO/R大鼠缺血侧脑皮质wnt/β-catenin信号转导通路上的多个基因表达发生变化，3d组模型与正常比较，下调基因有TCF3,wnt10a, wnt2, wnt7a, wnt9a，7d组模型与正常比较，上调基因有Mmp7, Wnt3a，下调基因有vangl2, DKK1, fzd2, myc,nkd1,sfrp5,wisp1, wnt7a。经益气活血方和补肾生髓方干预后，wnt/β-catenin信号转导通路上的不同功能多个基因发生上调下调的变化，3d益气活血组与模型组比较，上调基因有wnt7a；3d补肾生髓组与模型组比较，上调基因有RGD1561440,TCF3,wnt1,wnt7a,wnt9a,wnt9b；3d益气活血组与补肾生髓组比较，上调基因有Gsk3a,sfrp1,wnt9a,下调基因有wnt7b。7d益气活血组与模型组比较，上调基因有wnt2，下调基因有Fzd9, Mitf, Mmp7, Wnt1；7d补肾生髓组与模型组比较，上调基因有Vangl2,Sfrp2, Tle1, Wnt7b,下调基因有Cby1, Wnt8b, Actb；7d益气活血组与补肾生髓组比较，上调基因有Dkk3, Mmp7,RGDC，下调基因有Wnt8b,Wnt9a。并且再灌注7d时的基因变化数量比再灌注3d时增多。2实验二结果免疫组织化学实验结果显示，与3d正常组比较，3d模型组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度明显增加（P<0.01，P<0.05或P<0.01，P<0.01）；与模型组3d比较，3d益气活血组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度显著增加（P<0.01，P<0.01或P<0.05，P<0.05）；与模型组3d比较，3d补肾生髓组wnt7a平均光密度值增加（P<0.05），阳性面积增加无统计学意义（P>0.05），mmp7阳性面积和平均光密度增加（P<0.05，P<0.05）；3d益气活血组与3d补肾生髓组比较，wnt7a阳性面积增加（P<0.01），平均光密度值增加无统计学意义（P>0.05），mmp7表达的阳性面积和平均光密度值差异不明显（P>0.05，P>0.05）。与正常组7d比较，7d模型组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度增加（P<0.05，P<0.05或P<0.01，P<0.01）；与模型组7d比较，7d益气活血组wnt7a、mmp7阳性面积和平均光密度增加（P<0.05，P<0.05或P<0.01，P<0.01）；与模型组7d比较，7d补肾生髓组wnt7a平均光密度值增加（P<0.05），阳性面积增加无统计学意义（P>0.05），mmp7阳性面积和平均光密度值增加（P<0.05，P<0.05）；7d益气活血组与7d补肾生髓组比较，wnt7a阳性面积增加（P<0.05），平均光密度值增加无统计学意义（P>0.05），mmp7表达的阳性面积和平均光密度值增加（P<0.05，P<0.05）。益气活血组和补肾生髓组均能不同程度增加wnt7a的表达，降低mmp7的表达，但是在不同灌注时间段两组复方对指标的影响存在差异。结论：课题组在前期开展了一系列益气活血法和补肾生髓法防治缺血性脑卒中的理论和实验研究，论证了两种治法可以参与到脑缺血后炎症反应、凝血纤溶系统、细胞凋亡、神经可塑性等多个方面发挥脑保护的作用，并最终可促进神经干细胞的增殖分化。本实验研究在前期工作的基础上，发现益气活血方组、补肾生髓方组在再灌注两个时间点能使Wnt/β-catenin信号转导通路的多个基因表达发生变化，上调基因以wnt配体，转录因子，调控神经、血管和细胞发育分化的基因为主，下调基因以β-catenin摧毁器组分、拮抗因子、降解细胞外基质基因以及与细胞周期和凋亡相关的基因为主。并且两种中药复方能增强脑缺血侧额顶叶皮质wnt7a的表达，降低mmp7表达，但在不同灌注时间点存在差异。免疫组织化学的实验结果与PCR芯片的结果基本吻合，两种复方可能通过调节wnt7a和mmp7的表达，调控Wnt/β-catenin信号转导通路的功能，促进局灶性脑缺血再灌注后内源性神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的增殖分化。