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原发性肝癌是我国常见、难治性恶性肿瘤之一,占我国恶性肿瘤死亡率的第二位。手术切除仍为肝癌治疗的首选方法,但其疗效仍欠满意,术后复发是影响其疗效的主要因素,研究和寻找抗肝癌术后复发方法是近年来国内外学者共同关注的课题。本研究取手术切除后的肝癌组织和自体脾脏,分离获得肝癌细胞和自体激活B细胞。应用PEG融合技术,制备肝癌细胞与自体激活B细胞融合细胞,经~(60)Co照射制成人细胞融合肝癌疫苗,应用流式细胞仪,检测三批细胞融合率分别为66.84%,74.43%及76.55%。观察了肝癌细胞与自身激活B细胞融合前后细胞表达gp75,MHC-I,MHC-Ⅱ及B7变化,融合细胞不但表达肝癌细胞表面分子gp75,同时还高表达MHC-I,MHC-Ⅱ及B7。对~(60)Co照射后融合细胞生长,致瘤性及细胞表型进行观察。照射细胞失去增殖能力和裸鼠体内成瘤性,照射后3天内细胞表型无明显变化,仍表达gp75,MHC-Ⅰ,MHC-Ⅱ及B7。人细胞融合肝癌疫苗的无菌,热原质及内毒素试验结果均符合国家生物制品制备和检定标准。人细胞融合肝癌疫苗中PEG、甘油及庆大霉素残留量进行检测,结果分别为:PEG未检出,甘油残余量小于0.02%,庆大霉素残余量小于1mg/L。样品中PEG、甘油及庆大霉素均远低于其体内应用的有害剂量。上述试验结果提示该肿瘤疫苗的有效性和安全性。