葛根有效成分S86019对癌细胞的分化诱导作用及其作用机理的研究

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本文研究了中药葛根有效成分S86019对人早幼粒白血病细胞HL-60的体外和体内分化诱导作用及其对实体瘤人肝癌Bel7402细胞,小鼠黑色素瘤B16细胞和人结肠腺癌HCT-8细胞的分化诱导作用,并对其作用机理进行了初步探讨。 研究结果表明,S86019处理的HL-60细胞,在形态和功能上获得正常粒细胞特征,生长减慢。S86019在20μg/ml浓度明显抑制HL-60细胞增殖;用药6天后,60%的细胞获得NBT还原能力;S86019作用4天,70%细胞获得吞噬乳胶颗粒能力;细胞形态学观察证明,90%的HL-60细胞分化为趋于成熟的中性粒细胞,分化细胞以中、晚幼粒细胞为主。应用流式细胞仪分析证明,S86019 20μg/ml处理HL-60细胞48小时可明显阻断细胞由G1期向S期移行,96小时作用达高峰。 应用小鼠肾囊下移植HL-60细胞和小鼠腹腔置入扩散盒方法证明,S86019在体内对HL-60细胞也具有分化诱导和生长抑制作用。S86019 50mg/kg ip用药5天,在小鼠SRC中生长的肿瘤体积明显减少,S86019治疗组60%的细胞获得NBT还原能力,从形态上分化为成熟的粒细胞;在S86019作用下细胞也被阻断于G1期。S86019 50mg/kg ip给药6天,在小鼠腹腔扩散盒中生长的活细胞数为对照组的40%;形态上60%的细胞分化为成熟粒细胞,而对照组细胞仅有15%分化。另外S86019 50mg/kg po用药对HL-60细胞在小鼠腹腔扩散盒中的克隆形成能力有抑制作用,克隆形成数为对照组的68.3%。 将10μg/ml S86019与5μg/ml Bc-4,0.06μg/ml Ara-c或0.2μg/ml cDDP单独或联合应用处理HL-60细胞,结果表明,在所用低浓度下,药物单独处理HL-60细胞,对细胞生长有较弱的抑制作用,其诱导分化作用也较弱或没有作用。当S86019与cDDP联合应用时,对HL-60细胞的生长有明显的抑作用,分化诱导作用与单独用药无明显差别;当S86019与Bc-4或Ara-C联合应用时,对细胞的增殖有较强的抑制作用,并且具有较强的分化诱导作用。S86019与Bc-4联合应用4天,NBT阳性细胞达80%,75%细胞获得吞噬乳胶颗粒能力,90%细胞向成熟粒细胞方向分化;S86019与Ara-c联合应用4天,NBT阳性反应细胞达70%,82%的细胞获得吞噬能力,90%的细胞形态发生分化。S86019与Bc-4或Ara-C联合用药4天,可明显阻断细胞由G1期向S期移行,G1期细胞数明显增加。
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