回植不同直径软骨碎屑对软骨再生的实验研究

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目的胸廓畸形是多根的肋软骨切取术后常见的并发症之一。虽然已有术者将手术中剩余的肋软骨切碎回植至软骨膜腔,试图减少术后胸廓畸形的发生概率,但如何最大化利用剩余软骨仍然缺乏理论和数据支持。本实验构建兔动物模型,以模拟人体中手术切取多根肋软骨后胸廓损伤的过程,从而研究在供区软骨膜内回植不同直径自体肋软骨碎屑对供区修复再生的影响。方法1.取4只新西兰白兔,在完整保留肋骨-肋软骨连结处和软骨膜下,从双侧第5-7肋分别取5mm长肋软骨。术前用随机数表法确定不同胸廓缺损的处理方法(分别回植0.7mm、0.6mm、0.5mm、0.4mm、0.3mm直径软骨碎屑后缝合以及不回植软骨碎屑直接缝合),每只兔子的6根肋软骨缺损处理方法均不同。于术后4个月行肋软骨多层螺旋CT扫描及三维重建,观察各组胸廓及修复段大体形态学。2.取36只新西兰白兔,随机分为6组,用随机数表法确定每组胸廓缺损的处理方法(分别回植0.7mm、0.6mm、0.5mm、0.4mm、0.3mm直径软骨碎屑后缝合以及不回植软骨碎屑直接缝合),每组兔于右侧第5-7肋分别取5mm长肋软骨,每只兔子的3根肋软骨缺损处理方法均相同。于术后4个月行多层螺旋CT扫描及三维重建和生物力学性质检测;术后1,4,6个月行HE染色、阿尔新蓝染色、马松三色染色、Ki67免疫组织化学染色、I型胶原免疫组织化学染色及II型胶原免疫组织化学染色以探究修复段的组织类型。结果1.肋软骨多层螺旋CT扫描及三维重建结果提示回植的软骨碎屑直径为0.3mm及0.4mm时,供区修复段体积最大(p<0.05),且回植直径大小与修复段体积存在强相关关系(r=-0.862)。2.回植软骨碎屑组的AI指数绝对值均小于0.05,提示胸廓对称,且压缩模量(p<0.05)均优于未回植组,供区修复段组织4个月与6个月的压缩模量有统计学差异(p<0.05)。3.免疫组化染色提示,软骨碎屑边缘存在Ki67标记阳性的软骨细胞。肋软骨碎屑回植后供区再生组织阿尔新蓝染色及马松三色染色呈蓝色,I型胶原及II型胶原染色阳性。结论1、肋软骨切取术后早期,在本实验组的直径范围内,当回植直径越小,修复段体积越大。回植软骨碎屑组对胸廓畸形改善程度及生物力学性能均优于未回植软骨碎屑组,且肋软骨缺损修复段的生物力学性能随时间逐渐提高。2、本实验通过免疫组化染色可观察到回植的软骨碎屑界面大量软骨细胞增殖的现象,修复段组织由软骨组织及纤维组织组成。当回植直径越小,碎屑表面积越大,可观察到越多软骨细胞增殖。3、在长达6个月的观察中,回植的小直径(0.3mm及0.4mm组)软骨碎屑能稳定存活,当软骨碎屑回植时间越久,碎屑间边界趋于模糊,提示细胞向外生长。4、0.3-0.4mm直径区间的软骨碎屑可获得最大的再生修复段体积、较大的糖胺聚糖及胶原纤维含量,是本文中获得的最佳软骨碎屑回植直径。
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