目的:鹿茸是我国传统名贵中药,具有广泛的药理学活性。鹿茸作为一种特殊的软骨,是一个天然的细胞因子库,其中含有大量的蛋白质及蛋白多糖。近年来大量研究证明,蛋白多糖具有抗肿瘤作用,而以往对鹿茸的研究主要是醇提物,其中蛋白质和多糖类水溶性物质研究较少,对其水溶性物质进行系统的抗肿瘤研究更是鲜见,因此本研究通过缓冲液提取出水溶性蛋白质及蛋白多糖,系统的研究鹿茸水溶性提取物的抗肿瘤作用及其机理,同时研究鹿茸中蛋白多糖与化疗药物联合用药时的抗肿瘤效果并将其与鹿茸粗提物的抗肿瘤效果进行比较。方法:利用Tris缓冲液提取出鹿茸中水溶性成分,并分别用Bradford法和天青I法检测其中蛋白质及蛋白多糖含量;采用DEAE Sepharose FF阴离子交换树脂分离出水溶性提取物中的蛋白多糖,Bradford法和天青I法示踪检测洗脱液中蛋白质和蛋白多糖,根据洗脱曲线浓缩收集蛋白多糖组分,SDS聚丙酰胺凝胶电泳鉴定分离效果,冻干提取分离物;建立移植性S180肉瘤模型,随机将植瘤鼠分为7组,分别为阴性对照组(阴性对照组),阳性对照组(环磷酰胺,25mg/kg),鹿茸蛋白多糖低剂量组(40mg/kg)、中剂量组(80mg/kg)、高剂量组(160mg/kg),鹿茸粗提物组(400mg/kg),联合用药组(蛋白多糖80mg/kg+环磷酰胺25mg/kg),连续灌胃给药10d,阴性对照组灌胃生理盐水,阳性对照组隔天腹腔注射环磷酰胺,第11d脱颈椎处死小鼠,剥离肿瘤组织和脾,制备腹腔巨噬细胞悬液和脾淋巴细胞悬液,巨噬细胞吞噬中性红实验,T、B淋巴细胞转化实验,体内抑瘤活性及生命延长率,称重瘤组织和脾,计算抑瘤率和脾指数。结果:经检测鹿茸顶部蛋白质含量占鹿茸干重13.13%,蛋白多糖占鹿茸干重1.67%。离子交换层析在NaCl浓度为0.7mol/L,0.8mol/L,0.9mol/L时出现洗脱峰,经浓缩收集得到三个蛋白多糖组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,其蛋白多糖含量分别占总蛋白多糖含量的45.25%、25.15%、18.26% ,蛋白多糖提取率为88.66%。移植性肿瘤S180免疫调节试验结果表明,灌服蛋白多糖高剂量、鹿茸粗提物及联合用药荷瘤鼠各组间日增重无显著差异,脾指数,T、B淋巴细胞转化能力,巨噬细胞吞噬中性红功能均高于阴性对照组(P<0.05);蛋白多糖高剂量组荷瘤鼠T、B淋巴细胞转化能力,巨噬细胞吞噬中性红功能高于阳性对照组(P<0.05),脾指数无显著差异;鹿茸粗提物组荷瘤鼠的巨噬细胞吞噬功能和T淋巴细胞转化能力高于阳性对照组(P<0.05),B淋巴细胞转化功能和脾指数与阳性对照组间无显著差异;联合用药组荷瘤鼠脾指数,T、B淋巴细胞转化功能均高于蛋白多糖中剂量组和阳性对照组,但仅T淋巴细胞转化功能有显著差异(P<0.05)。移植性肿瘤S180抑制试验结果表明,鹿茸粗提物组抑瘤率(78.15%)与阳性对照组(39.87%)间存在极显著差异(P<0.01),联合用药组体内抑瘤率(50.16%)高于阳性对照组和蛋白多糖中剂量组(-23.07%),但与阳性对照组间不存在显著差异;蛋白多糖高剂量组抑瘤率(23.47%)低于30%;生命延长率方面蛋白多糖高剂量组(119.79%)、鹿茸粗提物组(119.79%)均高于阳性对照组(41.67%),但无显著差异;联合用药组生命延长率(212.50%)高于蛋白多糖中剂量组(103.13%)和阳性对照组,且与阳性对照组间有极显著差异(P<0.01)。结论:鹿茸顶部蛋白质含量占鹿茸干重的13.13%;蛋白多糖含量占鹿茸干重1.67%;利用DEAE Sepharose F.F阴离子交换层析能快速分离出鹿茸中蛋白多糖,此法相对快速,简便;通过移植肿瘤S180抑制试验发现,鹿茸粗提物对荷瘤小鼠的抑瘤效果最好,抑瘤率达78.15%;联合用药组荷瘤鼠的生命延长率最高,达212.50%;移植肿瘤S180免疫调节试验发现,蛋白多糖各剂量组对荷瘤鼠的免疫调节作用呈现一定剂量依赖关系,且蛋白多糖剂量达160mg/kg时,其免疫调节作用强于鹿茸粗提物和联合用药;蛋白多糖的免疫调节功能强于鹿茸粗提物;蛋白多糖与化疗药物联用可增强机体对化疗药物的耐受性。