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目的在目前针灸治疗中风病的基础上,结合现代药理学研究基础制备胶原川芎嗪缓释剂,研究在大椎、双侧内关穴位埋药对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子-κB(NF-κB)的调节作用。方法选用健康SD大鼠160只,随机分为6组:正常组10只,假手术组30只(24h组、72h组、120h组各10只),模型组30只(24h组、72h组、120h组各10只),腹腔注射组30只(24h组、72h组、120h组各10只),电针组30只(24h组、72h组、120h组各10只),穴位埋药组30只(24h组、72h组、120h组各10只)。采用大脑中动脉线栓法(MAGO)制备缺血再灌注模型,以胶原川芎嗪制备的缓释剂(药线)在大椎、双侧内关穴位埋药。每组中分别取各组各时相大鼠4只直接断头取海马用放射免疫法检测TNF-α的含量和用蛋白免疫印迹法检测NF-κB-p65蛋白含量;另外6只大鼠以10%水合氯醛麻醉,4℃的4%多聚甲醛200m1(含0.1%DEPC)经心脏灌注,迅速取脑,在视交叉平面前后2mm处将脑冠状切面切开,留取中间部分置于4℃的4%多聚甲醛固定液中过夜。将固定后的脑组织进行石蜡包埋。用免疫组化法检测缺血海马区NF-κB表达的变化。采用HPIAS-1000计算机高清晰彩色图像分析仪对切片进行图像分析,所有结果有SPSS13.0统计软件进行统计学处理。结果1.大脑中动脉缺血再灌注可明显损害大鼠的正常行为活动。穴位埋药、电针、腹腔注射组脑缺血再灌注大鼠神经体征均有明显改善,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01),其中穴位埋药能明显改善脑缺血再灌注大鼠神经体征(与腹腔注射组比较,P＜0.01;与电针组比较,P＜0.05)。2.放射免疫结果显示脑缺血再灌注模型24h组大鼠海马组织TNF-α含量即明显升高达到峰值,之后逐渐下降,与正常组,假手术组比较有显著性差异(P＜0.01);治疗各组大鼠缺血侧海马组织TNF-α含量均有所降低,与模型组同时相比较有显著意义(P＜0.01),并随时间的推移逐渐趋于正常。穴位埋药组治疗效果明显优于腹腔注射组和电针组(P＜0.01)。3.免疫组化及蛋白免疫印迹法结果显示:模型各组大鼠缺血侧海马CA1区NF-κB-p65蛋白表达显著升高,与正常组和假手术组比较有极显著差异(P＜0.01),且随再灌注时间而发生变化,72h表达达高峰,NF-κB移位于核明显;治疗各组大鼠缺血侧海马组织NF-κB-p65蛋白表达均有所降低,与同时相模型组比较有显著意义(P＜0.01)。模型各组大鼠缺血侧海马组织NF-κB-p65蛋白含量升高,与正常组和假手术组比较有一定差异,在72h其含量明显升高;治疗各组大鼠缺血侧海马NF-κB-p65蛋白含量均有所降低,与同时相模型组比较有显著性差异(P＜0.05);并随时间的推移逐渐趋于正常。其中穴位埋药组降低NF-κB-p65蛋白水平的效果明显优于电针组和腹腔注射组(P＜0.05)。结论大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后缺血侧海马组织中TNF-α含量即明显升高、缺血侧海马CA1区NF-κB-p65蛋白表达显著增高,NF-κB移位于核明显,导致脑急性缺血及再灌注损伤时炎症反应的发生,并引起继发的神经元损伤。穴位埋药可以通过降低脑缺血再灌模型大鼠海马组织TNF-α的水平,下调NF-κB蛋白水平,阻滞其转位于核,而发挥神经保护作用。