SNHG1在高糖培养的人视网膜色素上皮细胞中的表达及作用

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bengkuia521
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:1、观察不同浓度高糖培养对人视网膜色素上皮(h RPE)细胞的影响。2、观察核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1)在高糖培养的h RPE细胞中的表达变化,以及在高糖诱导的h RPE细胞上皮间质转化(EMT)及炎症中的作用。方法:1、观察不同浓度高糖培养对h RPE细胞的影响。ARPE-19细胞分为(1)正常组:5.5m M葡萄糖培养48h(2)30m M高渗组:30.0m M高渗培养基培养48h(3)30m M高糖组:30.0m M葡萄糖培养48h(4)60m M高渗组:60.0m M高渗培养基培养48h(5)60m M高糖组:60.0m M葡萄糖培养48h。RT-PCR检测上皮标志物E-钙粘蛋白(E-cadhrein)、紧密连接蛋白(ZO-1)的表达水平以及间质标志物波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;CCK8法检测各组细胞的增殖活力。2、SNHG1在高糖培养的h RPE细胞中的表达。60m M高糖分别刺激ARPE-19细胞0h、12h、24h、48h、72h,RT-PCR检测SNHG1的表达变化。3、SNHG1对高糖诱导的h RPE细胞EMT及炎症的影响ARPE-19细胞分为(1)正常对照组:5.5m M葡萄糖培养48h;(2)高渗对照组:渗透压60.0m M高渗培养基培养48h;(3)高糖干预组:60.0m M高糖培养48h;(4)si-NC组:将si-con SNHG1转染至细胞后,60.0m M高糖培养48h;(5)si SNHG1组:将si-SNHG1转染至细胞后,60.0m M高糖培养48h。RT-PCR检测各组细胞SNHG1的表达以及E-cadhrein、ZO-1、Vimentin、α-SMA的表达;CCK-8法检测各组细胞的增殖活力;细胞划痕实验检测各组细胞迁移面积;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;ELASA法检测各组细胞IL-6、IL-1β的蛋白表达。结果:1、不同浓度葡萄糖培养对h RPE细胞EMT的影响RT-PCR结果示:30m M及60m M高糖组细胞中E-cadhrein、ZO-1的表达显著低于正常组,Vimentin、α-SMA的表达显著高于正常组(P<0.05)。60m M高糖组中E-cadhrein、Z0-1表达低于30m M高糖组,Vimentin、α-SMA的表达高于30m M高糖组(P<0.05)。CCK8实验结果示:30m M高糖组细胞增殖能力与正常组相比无显著差异(P>0.05),60m M高糖组细胞增殖能力显著高于正常组及30m M高糖组(P<0.05)。2、SNHG1在高糖培养的h RPE细胞中的表达SNHG1在60m M高糖培养条件下呈时间依赖性升高,48h达到最高。3、SNHG1对高糖诱导的h RPE细胞EMT及炎症的影响RT-PCR结果显示:高糖干预组细胞中E-cadhrein及ZO-1表达量均低于对照组,Vimentin及α-SMA表达量均高于对照组(P<0.05);Si-SNHG1组E-cadhrein及ZO-1均高于si-NC组,Vimentin及α-SMA均低于si-NC组(P<0.05)。细胞划痕实验显示:高糖干预组细胞48h迁移面积显著大于对照组(P<0.05),si-SNHG1组细胞48h迁移面积显著小于Si-NC组(P<0.05)。CCK-8实验结果显示:高糖干预组细胞较对照组增殖活力高(P<0.05),Si-SNHG1组细胞较Si-NC组增殖活力低(P<0.05)。流式细胞术结果显示:高糖干预组细胞凋亡率显著小于对照组(P<0.05),si-SNHG1组细胞凋亡率显著高于Si-NC组(P<0.05)。ELASA结果示:高糖干预组细胞中IL-6、IL-1β均高于对照组(P<0.05)。si-SNHG1组细胞中IL-6、IL-1β均低于si-NC组(P<0.05)。结论:1、高糖培养可诱导h RPE细胞发生上皮间质转化。2、SNHG1在高糖培养的h RPE细胞中呈时间依赖性表达升高,并参与h RPE细胞的上皮间质转化和炎症过程。3、SNHG1通过促进上皮间质转化促进h RPE细胞的增殖、迁移并抑制其凋亡。
其他文献
固态锂电池采用固态电解质替代液态电解液,具有实现高安全性、高能量密度的巨大潜力。然而,在固态电池中,固态电解质与电极之间的界面存在巨大的挑战,例如固体电解质与正负极之间难以形成紧密且连续的导电界面,并会显著增加电极/电解质的界面阻抗。此外,石榴石型Li6.4La3Zr1.4Ta0.6O12(LLZTO)固体电解质易与空气中的水及二氧化碳反应生成碳酸锂等杂质,从而导致其对熔融锂的不浸润性。针对以上L
随着我国科学技术不断改革和创新,各行各业都逐渐向信息化方向发展,并且计算机技术在各行各业中得到了十分广泛的应用,也促进了我国电力企业的发展和改革。但是,电力企业在运用这些信息技术的过程中也会存在一定的安全风险,需要进行一定的管理和防范,这是企业稳定发展过程中必不可少的一项管理工作。文章主要以电力企业信息安全管理及风险防范策略为中心展开论述和分析。
随着社会的不断进步,对大数据的应用越来越多,也可以说大数据是时代进步的助力,社会各行各业的发展与大数据的使用密不可分,而大数据又势必伴随网络来使用,只有合理应用网络才能更好地发挥大数据的作用。因此必须保证网络的安全才可以为大数据的发展提供安稳可靠的平台。现代企业基本都建立了内部网络信息系统,通过网络共享平台分析市场的发展动态,让企业能够获得最新市场趋势,取得竞争优势。电力企业是国企,信息平台
期刊
芥子油苷(glucosinolates)是一类由氨基酸衍生而来的富含氮和硫的植物次生代谢产物,广泛存在于包括模式生物拟南芥和大量具有经济价值的蔬菜作物在内的十字花科植物中。芥子油苷被黑芥子酶降解后的产物在抵御昆虫、食草动物以及病原微生物的侵害等方面起到重要作用。对于人类而言,某些特定的芥子油苷的水解产物具有抗肿瘤的活性。芥子油苷的生物活性与其侧链的长度和结构密切相关。目前已知拟南芥中有五个黄素单氧
自新课程标准改革实施以来,要求教师对高中英语教育教学进行反思。反思性教育是帮助教师反思自己教学行为的一种重要方式,并帮助其构建适合自己和学生的教学理念以及教学方法、改善教学目的。本文通过对反思性教学的内容与重要性的分析探讨,提出了在教学中有效地实现反思性教学的方法策略。
苔藓植物是自然环境中的拓荒者之一[1]。现阶段对耐旱藓类的相关研究以及基因功能的研究和阐述并不详尽。本研究的目的基因GH394选自本实验室应用SMART技术构建的毛尖紫萼藓(Grimmia pilifera P. Beauv)干旱胁迫cDNA文库。经Blast比对,与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)序列相似度达89%,初步断定GH394基因为毛尖紫萼藓抗旱相关基因。根据NCBI中已报道的GST序列设
紫萼藓(Grimmiaceae)科植物多生长在砂土上或裸露的岩石上,为典型的耐旱藓类。据报道全世界有12个属,中国有6个属。主要分布在温寒地区,也常见于亚热带高海拔地区。本研究以紫萼藓科植物为研究对象,用叶绿体rps4基因和trnL-F基因作为分析指标。通过DNA直接测序获得了紫萼藓科3属39种rps4与trnL-F序列,并从Genbank中下载了相关科属种的部分序列。利用Clustalx、MEG
学位
学位
学位