犬1型腺病毒(Canine adenovirus type 1,CAV-1)又名犬传染性肝炎病毒(Canine infectious hepatitis virus,ICHV),该病毒能够引起犬的一种急性败血性传染病,称为犬传染性肝炎,该病主要发生在犬,也可以见于其他犬科动物,在犬主要表现肝炎和眼睛疾患,在狐狸则主要表现为脑炎,该病对于犬不分品种、性别、季节都能发生,但主要发生于1岁以内的幼犬,常常引起急性坏死性肝炎,在临床上经常与犬瘟热混合感染,故使病情更加严重复杂。本病几乎发生在世界各地。鉴于CAV-1已经对我国犬科动物构成极大威胁,因此积极开展CAV-1流行病学和免疫预防治疗有着重要的理论价值和现实意义。本研究通过制备抗抗犬1型腺病毒单克隆抗体和建立双抗夹心ELISA检测方法,在检测CAV-1方面具有简单、特异性好、稳定、方便、敏感性高、快速检测等优点,从而对尽早控制CAV-1的传播和流行奠定基础。通过杂交瘤细胞的筛选,获得三株稳定分泌抗CAV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为G3、C2、H2。根据H2与G3 McAb识别的抗原表位不同,分别用于包被酶标板和制备酶标结合物。用H2分泌的McAb与HRP标记G3 McAb建立双抗夹心ELISA检测方法。分别对双抗夹心ELISA检测的6个条件进行优化：CAV-1抗原最佳使用浓度、纯化的H2单克隆抗体最佳包被浓度、最佳封闭液、最佳封闭时间、HRP酶标G3McAb最佳反应浓度、HRP酶标G3 McAb最佳反应时间、底物作用时间。初步建立了检测CAV-1抗原的双抗夹心ELISA方法,为下一步研制检测CAV-1的诊断试剂盒奠定了基础。