研究表明宫内感染和宫内窒息均可造成早产儿脑损伤,并且是导致早产儿脑损伤的重要原因。但是临床上有许多宫内感染和宫内窒息同时存在的病例,而关于两者同时存在时是否能够加重早产儿脑损伤程度,目前国内外尚未有报道。因此,本试验通过建立宫内感染和宫内窒息对早产儿脑损伤联合作用的动物模型,探讨两者联合作用对脑损伤程度的影响,并通过免疫组化法观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)在术后不同时间的表达变化和神经细胞凋亡程度的不同,近一步研究脑损伤的发病机制,为早产儿脑损伤的防治提供理论依据。 对象: 妊娠18天的孕鼠随机分为两批。第一批分为四组:1.NS+假术组;2.LPS(O55:B5,Sigma,10mg)组;3.宫内室息组;4.LPS+宫内室息组。每组6只孕鼠,于不同处理后72h剖腹,取出胎鼠脑组织。第二批分为三组:1.NS+假术组;2.Ns+宫内室息组;3.LPS+宫内窒息组。每组又分别分为手术后4h、12h、24h、48h、72h五个时间点,每个时间点各6只孕鼠。条件满足后于各个时间点剖腹,取出胎鼠脑组织。 方法: 1.孕鼠准备:成年SD雌雄大鼠以4:1的比例合笼饲养,自合笼第二日起,每天早晨8点行阴道分泌物涂片,以发现阴道栓或光学显微镜下见到精子满视野为妊