近年来,骨质疏松症引起了医务工作者及研究人员的极大重视。成骨细胞增殖分化形成的骨量不能弥补破骨细胞骨吸收形成的骨表面凹陷是引起骨质疏松症的关键原因。维生素D3(Vitamin D3,VD3)和染料木素(Genistein,Gen)对治疗骨质疏松有很好的疗效,且来源广泛、价格低廉而成了研究骨质疏松症的热门。本论文中采用人骨肉瘤细胞MG-63、小鼠巨噬细胞RAW264.7以及小鼠颅顶前骨细胞MC3T3-E1和RAW264.7直接接触建立的共培养模式,探究维生素D3联合染料木素对成骨细胞和破骨细胞增殖、分化的影响及可能的作用机制。考察不同浓度维生素D3,染料木素及二者联合,对成骨细胞MG-63增殖的影响。结果表明浓度为6.25μM的维生素D3和染料木素联合时,成骨细胞的增殖活性显著提高至1.4倍,碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的活性显著提高至1.3倍,促进钙结节的形成,促进骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)的表达,抑制核因子κB受体活化因子配体(Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)的表达,OPG和RANKL的mRNA表达比值提高至21倍。维生素D3在6.25~50.00μM浓度时,可促进破骨细胞的分化和成熟,染料木素可逆转该促进作用。维生素D3可使破骨细胞中组织蛋白酶K的表达提高至1.6倍,联合染料木素组织蛋白酶K的表达降低至0.7倍。结果表明,维生素D3表现为浓度依赖性增强破骨细胞分化和成熟作用,联合染料木素则可显著抑制破骨细胞分化和成熟,间接起到抗骨质疏松作用。在构建的成骨/破骨细胞共培养体系中,维生素D3联合染料木素可增强成骨细胞ALP活性以及分化钙结节的积累。50μM的维生素D3可提高抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)活性至1.13倍,而染料木素的联合可逆转该促进作用,降低至0.8倍。结果表明,共培养体系可增强细胞间的相互作用,药物作用效果与单细胞培养方向一致。综上,本论文研究了维生素D3和染料木素对MG-63,RAW264.7诱导的破骨细胞以及成骨/破骨细胞共培养体系中成骨细胞和破骨细胞增殖与分化的影响。为维生素D3在治疗骨质疏松症方面提供有效参考。