论文部分内容阅读
目的:通过研究毡毛马兰化学成分及其抗免疫性肝损伤作用的相关性,阐明其抗免疫性肝损伤作用的物质基础。方法:毡毛马兰药材80%乙醇回流提取,采用各种色谱方法进行分离纯化,并使用各种波谱技术对化合物进行结构鉴定;毡毛马兰抗免疫性肝损伤作用的药效学研究;对不同批次的毡毛马兰药材进行指纹图谱研究;运用灰色关联度法对毡毛马兰药材的化学指纹图谱信息以及药效指标数据进行谱-效相关性研究。结果:分离并鉴定了65个化合物分别为:kalshinoid A（1）,kalshinoid B（2）,kalshinoid C（3）,kalshinoid D（4）,kalshinoid E（5）,kalshinoid F（6）,4α,7α-epoxyguaia-10α,11-diol（7）,ent-eudesm-4（15）-ene-1β,6α-diol（8）,pubescone（11（7→6）abeo-14-norcarabran-4,7-dione）（9）,schensianol A（10）,羟基香樟内酯（11）,1β-羟基-β-莎草酮（12）,10-羟基-15-氧化-α-杜松醇（13）,1-patchoulene-4α,7α-diol（14）,10β,15-羟基-α-杜松醇（15）,cosmosoic acid（16）,4（15）-桉叶烯-1β,7,11-三醇（17）,3-桉叶烯-1β,7,11-三醇（18）,4α,7β,11-trihydroxy-1βH,5αH-guai-10（14）-ene（19）,grasshopper ketone（20）,11-oxo-13-nor-alismol（21）,（s）-3-羟基-β-紫罗兰酮（22）,（3R,6R,7E）-3-hydroxy-4,7-megastigmadien-9-one（23）,3-羟基-β-紫罗兰酮（24）,9-hydroxy-4-megastigmen-3-one（25）,4α,10β,11-trihydroxy-1,5-trans-guai-6-ene（26）,4α,10α,11-trihydroxy-1βH,5βH-guai-7（8）-ene（27）,kalshiliod A（28）,3-吲哚乙醛酸（29）,1H-indole-3-carboxylic acid,ethyl ester（30）,香草醛（31）,丁香醛（32）,阿魏酸（33）,2-（4-羟基-3-甲氧苯基）-3-（2-羟基-5-甲氧苯基）-3-氧-1-丙醇（34）,金色酰胺醇乙酸酯（35）,对羟基苯甲酸（36）,丁香酸（37）,对羟基苯甲醛（38）,3-羟基-1-（4-羟基-3,5-二甲氧苯基）-1-丙酮（39）,对羟基苯乙醇（40）,2,3-二羟基-1-（4-羟基-3,5-二甲氧苯基）-1-丙酮（41）,linchuniinone（42）,olibanumol C（43）,叶绿醇（44）,methyl hematinate（45）,（1R,2R）-2-（5-methoxy-5-oxo-2-penten-1-yl）-3-oxocyclopentaneacetic acid methyl ester（46）,木栓酮（47）,D:B-friedoolean-5-en-3β-ol（48）,spinasterol（49）,（RS）-9-L1-phytoprostane（50）,kalshiflavone A（51）,5,7-二羟基-4′,6,8-三甲氧基黄酮（52）,kalshiolin A（53）,松脂素（54）,medioresinol（55）,丁香脂素（56）,（+）-异落叶松脂素（57）,刺五加酮（58）,vibruresinol（59）,（±）-5’-甲氧基落叶松脂素（60）,去氢双松柏醇（61）,（-）-simulanol（62）,（+）-（1S,2R）-1,2-双（4-羟基-3-甲氧基苯基）-1,3-丙二醇（63）,cleomiscosin C（64）,表丁香脂素（65）。药效学结果显示,模型组指标数据与正常组比较,均具有显著性的意义,同时毡毛马兰总提取物（Total extract of Kalimeris shimadai,TEK）能降低免疫性肝损伤小鼠血清过高的ALT、AST、NO、T-Bi L、AKP、MDA、TNF-α、IFN-γ、IL-4、i NOS水平,对抗SOD活性降低,升高GSH-Px水平,提示TEK具有保护免疫性肝损伤小鼠的作用。建立了毡毛马兰药材指纹图谱的色谱方法,对10批不同采收期药材进行指纹图谱分析,运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）”软件对HPLC指纹图谱进行相似度分析,结果显示由10个共有峰所确定的化学成分含量在不同批次药材中差异不明显。谱效相关性研究结果表明,第4、10、5、6号峰是抗免疫性肝损伤的主要药效峰。结论:从毡毛马兰药材中分离得到65个化合物,其中化合物1-6、28、51、53为新化合物,所有化合物均为首次从该植物中分离得到。毡毛马兰具有抗免疫性肝损伤作用。建立了毡毛马兰药材指纹图谱的色谱方法,为其质量控制提供依据。谱效相关性研究结果给出了毡毛马兰抗免疫性肝损伤作用的药效峰,在一定程度上揭示了其药效物质基础。