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柑橘果实有机酸以柠檬酸为主,是柑橘果实风味品质重要指标之一。本文以靖安椪柑(Citrus reticulata Blanco cv.Ponkan)果实为研究材料,利用高效液相色谱法(HPLC)和实时荧光定量技术(Q-PCR),研究了靖安椪柑果实发育阶段和采后处理对果实有机酸含量及柠檬酸代谢相关基因表达的影响,主要结果如下:1、靖安椪柑果实发育阶段单果重、可溶性固形物(TSS)、色差指数(CCI)、总糖含量均随果实发育成熟逐渐升高。柠檬酸为果实主要有机酸,发育过程中其含量变化规律与总有机酸和可滴定酸(TA)含量变化一致,均呈先上升后下降的变化。柠檬酸代谢相关基因表达及相关性分析结果显示,靖安椪柑果实CitCS1相对表达略有下降,CitCS2相对表达先增加后减少,两者皆与柠檬酸含量无显著性相关;CitAco1相对表达整体呈缓慢下降,与柠檬酸含量无显著性相关,CitAco2/3相对表达在发育前期其增长缓慢,后期迅速增加,与柠檬酸含量呈显著性负相关;CitIDH1相对表达呈先下降后上升的趋势,CitIDH2/3、CitGADs和CitGS2相对表达均呈先上升后下降的趋势,其中CitIDH1/2相对表达与柠檬酸含量达到极显著负相关;CitGAD4/5和CitCS2相对表达与柠檬酸含量不显著相关。因此,靖安椪柑果实发育阶段有机酸含量主要由柠檬酸含量决定,柠檬酸积累主要受CitAco2/3和CitIDH1/2等降解基因共同调控。2、以盛花后120d靖安椪柑果实为材料,研究了热空气处理对靖安椪柑幼果品质及柠檬酸代谢的影响,结果发现:40℃热空气处理48h能显著增加果实失重率和总糖含量,对CCI和TSS含量无显著影响;而果实有机酸含量特别是柠檬酸含量经热空气处理后显著降低。基因表达结果表明,热处理诱导CitCS1基因表达上调,使得CitCS1表达与对照达显著性差异水平;热处理后CitAcos、CitIDH1/3表达均显著上调,CitIDH2被短暂诱导表达;热处理还能显著促进CitGAD4基因表达,但对CitGAD5和CitGS表达无显著影响,说明热空气处理能促进靖安椪柑幼果柠檬酸的降解,使有机酸含量下降,这种变化和柠檬酸代谢相关基因表达有关,其中CitAcos、CitIDHs和CitGAD4表达上调可能是导致果实有机酸下降的主要原因。3、研究了采后热空气和壳聚糖涂膜处理对成熟靖安椪柑果实贮藏品质及柠檬酸代谢的影响,与对照相比,热空气处理(40℃,48h)加速果实重量、TSS和总糖含量的下降,而1.0%壳聚糖涂膜能延缓重量、TSS和总糖含量的下降,但两者对CCI无显著影响。整个贮藏期间,靖安椪柑果实柠檬酸含量变化趋势与总有机酸和TA含量一致,均随贮藏时间延长下降,热空气处理显著促进果实柠檬酸下降,壳聚糖涂膜显著延缓靖安椪柑果实柠檬酸的降解。与幼果研究结果类似,热空气和壳聚糖涂膜处理对果实有机酸的影响均与CitCSs表达无直接相关,热空气处理能诱导果实贮藏期间CitAco2/3、CitIDH2/3和CitGAD4等基因的表达,对CitGSs表达无显著性影响,这些降解相关基因表达增强与柠檬酸加剧降解密切相关;而壳聚糖处理可以抑制果实CitAco3、CitGAD4基因表达,使得壳聚糖涂膜处理果实柠檬酸在贮藏期间降解速率减缓。这些结果均说明靖安椪柑成熟果实柠檬酸的降解受GABA途径调控。