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免疫疗法是一种利用病人自身免疫系统对抗癌症的新型治疗方法。研制安全高效的癌症疫苗是癌症免疫治疗领域的重要研究方向之一。现今已经有针对某些特定类型癌症的预防性疫苗在临床治疗上应用,但针对癌症的治疗性癌症疫苗仍然需要进一步研究开发。穿膜肽(Cell-penetratingpeptide,CPP)是一种具有穿膜能力的多肽,本研究基于一种新型细胞穿膜肽—胞质定位内化肽6(Cytosol localizing internalization peptide 6,CLIP6)与模式抗原鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联作为增强抗原,以CpG(CpG oligodeoxynucleotide)为免疫佐剂,开发了一种新型的癌症疫苗。基于上述内容,本论文首先对癌症免疫疗法,传统疗法,穿膜肽,抗原提呈等进行了简要概述,并进行了下述两方面的工作:1.设计了一种新型癌症疫苗CLIP6-OVA,并且优化了穿膜肽CLIP6与OVA的偶联方法,使用荧光定量法确定了 OVA与CLIP6的偶联效率为1:8。在树突状细胞及巨噬细胞中,通过与CLIP6偶联,OVA进入细胞效率显著提高。同时CLIP6改变了抗原的入胞机制,使模式抗原OVA直接进入细胞胞质经由蛋白酶体加工,最终被主要组织相容性复合物I(Major histocompatibility complex I,MHCI)提呈。2.将免疫佐剂CpG引入基于CLIP6的疫苗策略后,CLIP6-OVA/CpG能有效地刺激髓源树突状细胞(Bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)成熟并显著提高抗原交叉呈递效率。此外,在活体水平实验中CLIP6-OVA/CpG作为预防型疫苗可有效延缓肿瘤的生长,延长小鼠的生存期。将CLIP6-OVA/CpG作为治疗型疫苗与免疫检查点阻断疗法相结合后,可显著抑制已发生肿瘤的生长速度,延长小鼠的生存时间。在对癌症新抗原疫苗的初步探索中,新抗原表现出了一定的免疫原性,而穿膜肽CLIP6未能提高新抗原的癌症治疗效果。本论文设计了基于CLIP6的癌症疫苗策略在针对模式抗原的癌症治疗上取得了良好的成效。这种策略具有制备简单、成本低、生物相容性好等特点,在临床治疗上易与肿瘤相关抗原或新抗原等策略结合,具有广阔的临床应用前景。