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目的:肝癌(Liver cancer)是最多见的恶性肿瘤之一,全世界50%以上的新发和死亡患者发生在中国,我国肝癌死亡率位居癌症死亡率第二位,其中肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)占原发性肝癌的85%至90%。研究发现肝炎、酒精性脂肪肝(Alcoholic fatty liver disease,AFLD)、非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)与肝细胞癌的发生密切相关,且预后差。固醇调节元件结合蛋白1(Sterol regulatory element binding protein 1,SREBP1)是胆固醇、脂肪酸、磷脂合成中的重要转录因子。研究发现在糖尿病、酒精性脂肪肝/非酒精性脂肪肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis,NASH)、病理性肥胖、高脂血症等多种代谢性疾病中SREBP1异常高表达。SREBP1亦在多种肿瘤中异常高表达,并且与肿瘤恶性程度密切相关。制何首乌是历版中国药典收载的品种。制何首乌味苦、甘、涩,微温,能乌须发,化浊降脂,补肝肾。制何首乌同时具有抗高脂血症和抗肿瘤作用,但制何首乌抗肿瘤是否通过抑制SREBP1从而抑制肝细胞癌脂肪代谢不得而知,因此,本研究将探讨二者之间的关系。方法:(1)按照中国药典方法制备制何首乌乙醇提物(HSWE),并用HPLC对提取物进行质量分析;(2)将人肝癌细胞Bel-7402分为常脂(NN)、低脂(NL)两个组。(1)制何首乌醇提物(1000、600、400、250、125、25、0μg/m L)作用12 h、24 h后,以MTT来测定每组细胞经制何首乌醇提物(HSWE)作用后的OD值,观察其抑制率;(2)制何首乌醇提物(600、400、0μg/mL)作用12 h。1)JC-10荧光探针检测线粒体膜电位的变化,Hoechst 33258荧光染色、流式细胞仪检测细胞凋亡;2)全自动生化仪检测制何首乌醇提物(HSWE)处理细胞后细胞中TC、TG、ALT、AST的变化;3)UPLC-MS检测细胞中油酸、硬脂酸、棕榈酸和棕榈油酸的变化;4)提取RNA,进行转录组测序;5)提取RNA,RT-PCR检测脂代谢相关基因mRNA的表达水平;6)Western blot检测SREBP1、SCD1、FABP3蛋白的表达。结果:(1)HPLC检测结果显示制何首乌醇提物中游离蒽醌含量为:0.10%,二苯乙烯苷含量为:8.09%,符合中国药典(2015版)要求;(2)制何首乌醇提物作用12 h、24 h抑制Bel-7402肝癌细胞增殖;制何首乌醇提物作用Bel-7402肝癌细胞12 h后细胞中ALT、AST水平增加,线粒体膜电位下降,促进细胞凋亡;(3)制何首乌醇提物作用于Bel-7402肝癌细胞后,肝癌细胞TG、TC水平下降,油酸/硬脂酸、棕榈油酸/棕榈酸的比值下降;(4)制何首乌醇提物作用于Bel-7402肝癌细胞后脂代谢相关因子SCD1、FABP3的mRNA和蛋白水平降低;(5)制何首乌醇提物作用于Bel-7402肝癌细胞后脂生成关键因子SREBP1的mRNA和蛋白表达受到抑制。结论:制何首乌醇提物通过抑制脂代谢关键因子SREBP1的表达,从而抑制肝癌细胞的脂代谢,进而诱导肝癌细胞的内源性凋亡。