目的：找出一种具有高敏感性、高特异性的多个甲基化标志物联合诊断方案,用以在尿液中诊断膀胱癌。方法：通过MSP技术鉴定从文献中挑选的14个膀胱癌甲基化标志物和4个内参基因,最终选择EOMES,GDF 15,NID2,PCDH17,POU4F2,TCF21和ZNF154 7个候选甲基化标志物,并选择ALU-C4作为内参基因。利用qMSP技术在58个膀胱尿路上皮癌患者尿液、20个尿路结石伴感染患者尿液、20个肾癌患者尿液及30个健康志愿者尿液中检测7个候选标志物的相对甲基化水平。绘制每个基因的ROC曲线,计算其敏感性和特异性。并通过logistic回归方程联用多种标志物生成联合预测因子。再针对不同组合方案的联合预测因子绘制ROC曲线并计算其敏感性和特异性。结果：在现有样本群体中,最好的三种联合诊断方案为PCDH17+POU4F2(C1), PCDH17+POU4F2+NID2(C2),PCDH17+POU4F2+EOMES(C3),其敏感性和特异性分别为9138%和94.29,91.38%和90.00%,93.10%和92.86%。这三种组合方案的敏感性和特异性都超过了任何一种单个甲基化标志物的诊断效果,除了C2的特异性没有POU4F2单独诊断的特异性高。结论：通过多个甲基化标志物联合诊断的方案可以在尿液样本中早期诊断膀胱癌,并具有高敏感性和高特异性的特点。其诊断效果超过了任何一种单个甲基化标志物的诊断效果。多个甲基化标志物联合诊断的方案适合在大规模人群中早期诊断膀胱癌或筛查高危人群。