背景:盆腔器官脱垂（pelvic organ prolapse,POP）是指盆腔器官脱出于阴道内或阴道外,严重影响患者生活质量。POP是一种多病因疾病,如阴道分娩次数、年龄、体重指数等均被认为与POP的发生相关。基因缺陷导致盆底细胞外基质结构及功能异常是女性POP发生发展的重要分子基础。胶原纤维和弹力纤维作为细胞外基质的重要组成部分,以筋膜、韧带等形式给予盆底组织抗拉伸强度,在维持盆底器官正常位置和功能中发挥重要作用。盆底韧带和筋膜主要细胞是成纤维细胞。微小RNA（microRNA,miRNA）为长度约19-22个核苷酸的非编码RNA,在转录后调控基因表达。miR-200b已被确认参与多种纤维化疾病,如肺纤维化、肾脏纤维化和心脏纤维化等。目的:探讨microRNA-200b在体外原代及传代培养的盆腔器官脱垂患者子宫旁骶韧带成纤维细胞中的表达,进而为盆腔器官脱垂的发病机制和未来的治疗提供可行的理论基础与方法指导。方法:1.收集因盆腔器官脱垂（根据盆腔脱垂定量分期法II期或以上）行子宫切除术患者的子宫旁骶韧带标本10例作为实验组,收集无盆腔器官脱垂行子宫切除术患者子宫旁骶韧带标本10例作为正常对照组,采用改良的I型胶原酶消化法,对盆腔器官脱垂实验组和无盆腔器官脱垂正常对照组的子宫旁骶韧带成纤维细胞进行体外原代及传代培养。2.对所培养的两组样本子宫旁骶韧带成纤维细胞采用形态学观察、免疫组化、免疫荧光方法来进行鉴定细胞的种类、纯度,保证细胞数量,比较两组样本细胞的差异。3.采用SPSS25.0软件对实验组及对照组在年龄、体重指数、盆腔器官脱垂家族史人数比例、绝经期人数比例及正常自然分娩情况等相关临床特征进行分析比较。4.运用实时荧光定量PCR方法,检测microRNA-200b基因在无盆腔器官脱垂的正常对照组及盆腔器官脱垂的实验组子宫旁骶韧带成纤维细胞中的表达水平,采用2^-△△Ct方法计算两组microRNA-200b基因的相对表达量,以U6为内参基因,相关计算公式:△△Ct值=(Ct_{micro RNA-200b}-Ct _U6)_实验组-(Ct_{microRNA-200b}-Ct _U6)_对照组,最后用SPSS25.0软件对于我们结果进行统计学分析。结果:1.经体外原代及传代培养最终获得的P3代子宫旁骶韧带细胞于倒置相差显微镜下进行形态学观察,细胞多呈长梭形,彼此连接密集排列,呈旋涡状或放射状排列,境界清楚,胞体较大,胞质透明,细胞核较大,多呈椭圆形,符合成纤维细胞的形态学特征,与正常对照组成纤维细胞相比,盆腔器官脱垂组成纤维细胞数量较少,较稀疏;免疫组化法波形蛋白表达阳性,证明培养的细胞为成纤维细胞;免疫荧光波形蛋白呈弥漫性强绿色荧光,进一步验证所培养的细胞为成纤维细胞。2.采用SPSS25.0软件对实验组（盆腔器官脱垂组患者）及对照组（无盆腔器官脱垂组患者）在年龄、体重指数、盆腔器官脱垂家族史人数比例、绝经期人数比例及正常自然分娩情况之间比较,差异无统计学意义（P均>0.05）,说明这20名受试者组间匹配良好。3.使用2^-△△Ct来表示microRNA-200b基因在实验组与正常对照组中的表达差异,2^-△△Ct〉1,表示microRNA的表达水平上调,反之,2^-△△Ct〈1,表示microRNA的表达水平下调,本实验结果2^-△△Ct〉1,表示与无盆腔器官脱垂对照组相比,microRNA-200b基因在盆腔器官脱垂组子宫旁骶韧带成纤维细胞中表达水平上调,且P〈0.01,差异有统计学意义。结论:与正常子宫旁骶韧带成纤维细胞相比,microRNA-200b基因在盆腔器官脱垂患者子宫旁骶韧带成纤维细胞中表达水平显著增高,提示microRNA-200b基因可能参与盆腔器官脱垂的发病过程。