【摘 要】
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目的以结肠炎模型大鼠为研究对象,观察:慢性结肠炎模型引起的穴位痛觉敏化与沉默型C类神经元现象;生理及病理条件下,CHRNA3标记的沉默型C类神经元的分布规律及其“唤醒”特性;结肠炎模型引起的穴位痛觉敏化、内脏敏化是否与沉默型C类伤害神经元激活相关;结肠炎模型引起的脊髓背角中枢敏化是否与沉默型伤害神经元“唤醒”相关。方法本实验以SD大鼠为实验对象,通过TNBS+50%乙醇制作慢性结肠炎模型,于造模后
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（No.81904309,81873389,81973967）； 中央公益性科研院所基本科研业务专项资金（No.201814001）；
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目的以结肠炎模型大鼠为研究对象,观察:慢性结肠炎模型引起的穴位痛觉敏化与沉默型C类神经元现象;生理及病理条件下,CHRNA3标记的沉默型C类神经元的分布规律及其“唤醒”特性;结肠炎模型引起的穴位痛觉敏化、内脏敏化是否与沉默型C类伤害神经元激活相关;结肠炎模型引起的脊髓背角中枢敏化是否与沉默型伤害神经元“唤醒”相关。方法本实验以SD大鼠为实验对象,通过TNBS+50%乙醇制作慢性结肠炎模型,于造模后第7d进行实验,分为两部分进行:实验一雄性清洁级SD大鼠34只,随机分为正常组（n=4）,对照组、模型组和模型加阻断剂组（n=10）。观察大鼠体表的伊文思蓝渗出点分布,并与治疗肠道疾病常用穴位分布进行对比,分析其分布规律;观察沉默型伤害神经元在大鼠外周组织中的分布情况,为实验二奠定基础。实验二雄性清洁级别SD大鼠30只,随机分为对照组、模型组和模型加阻断剂组（n=10）。采用免疫荧光实验观察沉默型伤害神经元DRG和SDH激活情况。为评估沉默型伤害神经元参与内脏炎症引起的疼痛相关行为学反应,使用VMR观察内脏痛敏;用手持Von Frey测量足底机械性牵涉痛,用电子Von Frey测量尾骶部机械性牵涉痛,用热辐射痛测定仪测量足底热牵涉痛。结果1.TNBS+50%乙醇能够造成明显的结肠炎症性反应,结肠同节段的尾骶部皮肤出现EB渗出点。使用U0126后结肠组织炎性病变减轻,EB渗出点减少。CHRNA3标记的沉默型伤害神经元胞体与及神经纤维分布于尾骶部皮肤、结肠、DRG和脊髓背角浅层中,神经元主要归类于C类伤害感受神经元,且有被NGF激活并转换成机械响应性的结构基础。2.DRG初级感觉神经元中的沉默型伤害神经元能够被内脏炎性反应所激活,并引起结肠相关节段脊髓背角产生中枢敏化。U0126能阻断DRG中沉默型伤害神经元的激活,并降低中枢敏化程度。沉默型伤害神经元参与大鼠慢性结肠炎引起的内脏扩张机械痛敏、尾骶部和足底的机械牵涉性痛敏,但不参与足底热牵涉性痛。结论这种沉默型伤害神经元参与到大鼠慢性结肠炎引起的体表和内脏痛觉过敏产生,穴位敏化特性的神经机制与沉默型伤害神经元“唤醒”相关。
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