铁皮石斛多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

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铁皮石斛(Dendrobium officinale)是一种兰科植物,主要分布于我国的广西、浙江、安徽等地,铁皮石斛具有较高的药用价值,有“救命仙草”的美誉。近年来在铁皮石斛的育种、种植、有效成分提取等方面开展了研究。本文利用响应面法优化了超声波辅助提取铁皮石斛多糖的工艺,比较了超声波辅助提取多糖与传统热水浸提多糖清除DPPH自由基与羟基自由基的能力。通过抑菌试验测定了铁皮石斛多糖和铁皮石斛水提物的抑菌功能;通过用铁皮石斛喂食果蝇,测定了果蝇体内抗氧化酶的活力及逆重力爬行能力等指标,探讨铁皮石斛多糖对生物体的抗衰老作用。利用响应面法优化低功率超声波辅助提取铁皮石斛多糖的工艺,结果表明超声波辅助提取铁皮石斛多糖的最佳工艺条件为:提取温度40℃、液料比50:1、超声波处理时间30 min、提取次数2次,此条件下铁皮石斛多糖的提取率为(25.28%±0.26%)与理论误差为1.02%,比传统的热水浸提法多糖的提取率提高了18%。利用低功率超声波辅助提取的铁皮石斛多糖,其抗氧化性得到有效保护,清除DPPH自由基的能力要优于传统热水提取法。通过对不同产地的铁皮石斛多糖的抗氧化性比较,结果发现:产地江苏的铁皮石斛多糖清除羟基自由基的能力优于产地云南、安徽的铁皮石斛多糖;产地安徽的铁皮石斛多糖清除DPPH自由基的能力优于产地云南、江苏的铁皮石斛多糖;三个不同产地的铁皮石斛多糖清除超氧阴离子的能力基本相同,可为有方向的选择铁皮石斛产品提供一定的参考。通过对铁皮石斛多糖除蛋白方法工艺比较,得出Sevage法除蛋白优于酸沉法除蛋白。对铁皮石斛多糖和铁皮石斛水提物的抑菌功能研究发现,铁皮石斛水提物对褔氏致病菌有一定的抑制作用。对乙型致病菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌无抑制作用,本实验中铁皮斛多糖均未发现有对以上菌有抑制作用。对果蝇饲喂高(铁皮石斛多糖含量1.0%)、中(铁皮石斛多糖含量0.5%)、低(铁皮石斛多糖含量0.25%)不同剂量的铁皮石斛多糖测定其SOD、CAT酶活力以及MDA含量、寿命、逆重力爬行能力、平均体重等指标,发现喂食铁皮石斛多糖后,各处理组果蝇的SOD、CAT酶活力以及MDA含量、寿命、逆重力爬行能力、平均体重均优于未喂食铁皮石斛多糖的对照组,喂食中剂量的SOD、CAT酶活力以及MDA含量、寿命、逆重力爬行能力、平均体重优于高剂量组和低剂量组。中剂量雄果蝇组比对照组雄果蝇SOD活力提高25.77%,MDA含量降低46.51%,CAT活力提高28.88%,平均最大寿命延长21.52%,半致死时间延长29.29%,最长寿命延长22.97%。中剂量雌果蝇组比对照组雌果蝇SOD活力提高6.70%,MDA含量降低18.34%,CAT活力提高59.62%,平均最大寿命延长15.42%,半致死时间延长35.06%,最长寿命延长16.57%。喂食铁皮石斛多糖果蝇可能通过提高SOD、CAT活力,提高了机体的抗氧化性能,进而延长了果蝇的寿命、提高了重力爬行能力、平均体重。
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