【摘 要】
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抗生素残留超标已成为影响动物性食品安全问题的主要原因之一,动物产品的任何可食用部分的抗生素残留不但包括原药,还有在动物体内代谢得到的产物。四环素是一种常见抗生素,人们长期食用四环素残留超标的食品会增加病原菌的耐药性,干扰人体肠道内的正常菌群,影响骨骼发育等。为了预防四环素的危害,建立四环素检测技术对食品工业和公众健康至关重要。目前微生物分析法、色谱法、免疫分析法、紫外可见分光光度法、电化学分析法、
【基金项目】
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中组部人才项目基金(编号:A279021724); 西北农林科技大学科研启动经费项目(编号:Z111021601);
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抗生素残留超标已成为影响动物性食品安全问题的主要原因之一,动物产品的任何可食用部分的抗生素残留不但包括原药,还有在动物体内代谢得到的产物。四环素是一种常见抗生素,人们长期食用四环素残留超标的食品会增加病原菌的耐药性,干扰人体肠道内的正常菌群,影响骨骼发育等。为了预防四环素的危害,建立四环素检测技术对食品工业和公众健康至关重要。目前微生物分析法、色谱法、免疫分析法、紫外可见分光光度法、电化学分析法、适配体传感器等方法在四环素的检测中已经得到了应用,但这些方法仍然会存在一些缺陷,比如样品处理过程复杂、检测方法繁琐、成本高、耗时长等。因此,开发动物源性食品中四环素类抗生素残留的快速检测方法是十分有意义的。本研究以残留在动物性食品中的四环素为检测对象,分别研究建立了高效、灵敏的荧光以及免疫层析试纸条快速检测方法,主要研究结果如下:1、基于荧光二硫化钼纳米片(MoS2NPs)灵敏检测四环素(TET)的方法构建及性能鉴定:本实验通过“自下而上”的水热途径,将钼酸钠和谷胱甘肽(GSH)作为前驱体,提供钼源和硫源,合成了荧光二硫化钼纳米片来特异性检测四环素。制备得到的MoS2NPs在水溶液中发出蓝色荧光,在325 nm和430 nm处具有激发和发射峰,加入TET后会由于内滤效应和电子转移的协同作用使MoS2NPs的荧光发生明显猝灭。我们将MoS2NPs作为检测探针构建了检测TET的荧光猝灭型传感器。通过Stem-Volmer方程评估了TET对MoS2NPs的荧光猝灭行为,结果表明其属于动态猝灭类型。在最佳条件下,用该方法对四环素进行了测定,TET浓度为0.1-50μM的范围内,MoS2NPs荧光强度与其呈现良好的线性关系,计算得出检测限为0.032μM。另外该方法可成功应用于牛奶、奶粉以及牛肉样品中TET的检测,回收率在89.11%-102.92%,表明此荧光传感器适用于TET快速测定。2、基于二硫化钼纳米片的四环素免疫层析快速检测试纸条的构建及性能鉴定:在本实验中,用超声辅助液相剥离法把块状MoS2制备成纳米片,采用简单的差速区带离心策略将不同尺寸和厚度的MoS2纳米片(L-MoS2、M-MoS2和H-MoS2)进行分级,同时将抗体简单混合标记到MoS2纳米片上,不需要复杂的交联剂。与抗体成功结合的三种尺寸MoS2纳米片可作为三种不同形式的探针,构建竞争型免疫传感器,用于高灵敏度检测四环素。MoS2不仅为固定生物分子提供了合适的平台,还由于所需抗体量较少而促进了竞争免疫的发生,进一步提高了传感器的性能。通过免疫色谱反应,目标分子TET和检测线上的TET抗原激烈地竞争捕获数量极少的MoS2-Abs探针,使得裸眼检测信号更加明显。该传感器表现出超高的灵敏度,检测限为0.052 n M,具有出色的特异性,可以应用于牛奶、蜂蜜和牛肉的食品样品中TET的检测。这项工作扩展了二维材料在免疫层析试纸条上应用的潜力。
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