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背景:长链非编码RNA肌动蛋白丝状相关蛋白1反义RNA1（LncRNA-AFAP1-AS1）在癌症研究中备受关注。LncRNA AFAP1-AS1是由AFAP1蛋白转录而来。肝癌中1ncRNA AFAP1-AS1的生物功能和调节机制仍不清楚。CRK最初作为一种癌基因蛋白,起源于禽类肉瘤病毒CT10,由SH2和SH3域组成。CRKI、CRKII和CRKL是CRK家族的三个成员,在许多组织中广泛表达。近年研究表明,CRKL的异常表达通过调控细胞骨架重组和信号转导过程,与多种癌症及其进展密切相关。目的:我们研究了 CRKL和lncRNA AFAP1-AS1呈双向正相关关系。本研究探讨了 LncRNA AFAP1-AS1通过c-Src/CRKL调节机制调控肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和转移能力,并且探讨了 LncRNA AFAP1-AS1在肝癌中调控Ras、MEK、c-Jun-EMT信号通路。方法:通过qRT-PCR对HCC组织和细胞系中的1ncRNA AFAP1-AS1表达进行了研究。通过qRT-PCR和western blot,研究CRKL mRNA和蛋白质表达水平。分别采用MTT法、克隆形成实验、transwell小室实验以及划痕实验研究抑制LncRNA AFAP1-AS1后对HCC细胞增殖、集落形成、迁移侵袭和转移潜能的作用。通过western blot检测LncRNA AFAP1-AS1 下调对 c-Src、Ras、MEK、c-Jun、EMT相关基因的作用。结果:与各自癌旁组织样本相比,在肝癌组织样本中LncRNA AFAP1-AS1明显上调,并且相比正常良性肝细胞L02,在低转移性肝癌细胞Huh7,高转移性肝癌细胞HCCLM3、HepG2 中,LncRNA AFAP1-AS1 水平显著高表达。通过 siRNA 下调 LncRNA AFAP1-AS1的表达水平,可以显著降低HepG2和HCCLM3细胞的增殖、集落形成、迁移、侵袭和转移能力。在肝癌患者样本中,LncRNA AFAP1-AS1与CRKL表达水平呈正相关。利用siRNA敲低CRKL可显著抑制LncRNA AFAP1-AS1在HepG2和HCCLM3中的表达水平,CRKL上调后可显著提高HepG2和HCCLM3中LncRNA AFAP1-AS1的表达水平。另一方面,LncRNA AFAP1-AS1的缺失显著下调了 HepG2和HCCLM3中CRKL的表达。LncRNA AFAP1-AS1敲除显著降低了 c-Src激酶在HepG2和HCCLM3细胞系中的表达水平。LncRNA AFAP1-AS1在HepG2和HCCLM3中的表达下降,使信号蛋白Ras、MEK、c-Jun表达下降。LncRNA AFAP1-AS1的缺失还通过增加E-cadherin的表达、降低N-cadherin和vimentin在HepG2和HCCLM3中的表达来影响上皮-间质转化（EMT）过程。结论:综合我们的研究结果,证明LncRNA AFAP1-AS1可以作为关键的疾病生物标志物。LncRNA AFAP1-AS1 可通过 c-Src/CRKL 轴调控 Ras/MEK/c-Jun 和 EMT 通路,从而促进HCC细胞的增殖、迁移和侵袭。因此,LncRNA AFAP1-AS1和CRKL可能成为肝癌的潜在治疗靶点。