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背景:髓母细胞瘤(Medulloblastoma,MB)是儿童中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,WHO分级为IV级,属中枢神经系统原始神经外胚层肿瘤,常起源于小脑蚓部,具有高度侵袭性,可通过脑脊液扩散并转移至脊髓。临床上以神经外科显微手术治疗及术后辅以放射治疗和化学治疗为主,但患者治疗后仍较易复发,预后较差。因此,为了寻找更有效的治疗方案,需进一步了解MB发生发展的机制,从分子水平上找到治疗的新靶点。越来越多的研究表明,miRNA在MB的发生发展中起着重要作用,对肿瘤的增殖、侵袭、迁移、凋亡等均有不同程度的影响,因此,miRNA可能作为MB全新的分子治疗靶点,从而成为新的研究热点。目的:1.分析MB组织中miRNA的表达谱,筛选明显差异表达的miRNA;2.验证miR-129-5p对MB增殖、侵袭、迁移及凋亡等生物学行为的影响;3.预测并分析miR-129-5p的靶基因,并在组织和细胞中验证其表达情况。方法:1.查阅NCBI GEO数据库,通过生物信息学方法,分析MB组织中miRNA的表达情况,并筛选出其中显著表达差异的miRNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术进一步验证;2.用has-miR-129-5p mimic转染MB细胞系Daoy,上调miR-129-5p的表达,并通过qRT-PCR技术验证转染Daoy细胞后miR-129-5p表达水平,然后通过CCK-8、Transwell、细胞划痕及流式细胞术实验,分别检测miR-129-5p表达改变对Daoy细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响;3.通过生物信息学方法,预测并筛选出SOX4基因是miR-129-5p的下游目的基因,进一步通过qRT-PCR技术及蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB),验证SOX4基因在MB组织和正常脑组织中以及Daoy细胞中的差异表达情况。结果:1.通过对Pubmed GEO数据库中的数据进行分析,最终确定差异miRNA即miR-129-5p,并在组织上验证后,发现其在MB组织中的表达明显低于正常脑组织,差异有统计学意义;2.转染miR-129-5p后,Daoy细胞增殖、迁移及侵袭均受到不同程度的抑制,凋亡水平增加;3.通过生物信息学预测SOX4为miR-129-5p潜在靶基因。SOX4基因在MB组织中的表达量明显高于正常脑组织,差异具有显著统计学意义;并且miR-129-5p下调Daoy细胞SOX4表达水平。结论:本研究发现miR-129-5p在MB中表达量降低,上调其表达后,可通过负向调控SOX4来抑制MB细胞增殖、迁移、侵袭并诱导MB细胞凋亡。这一调控机制为探索MB的分子靶向治疗靶点提供了全新的思路。