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麦芽糖α-淀粉酶是指一类能够单独水解淀粉获得麦芽糖含量在50％以上糖浆的α-淀粉酶，如与脱支酶配合使用水解淀粉能获得麦芽糖含量达70％以上，因而高产麦芽糖α-淀粉酶在工业生产麦芽糖浆中有重要的应用前景。 本研究采用定点突变的方法分别对来自Thermobifida fusca和Saccharomonospora viridis的麦芽糖α-淀粉酶(Tfa和Sva)进行分子改造，使其酶学性质改善特别是增加水解淀粉的麦芽糖产量以适应工业生产上对高产麦芽糖α-淀粉酶的需求。通过同源建模，选定Tfa的D-219、K-222、H-223、和Y-247这四个关键活性位点定点突变，其中Lys-222与His-223位于底物结合裂缝催化亚位点+2;选定Sva的His-220进行突变研究，其位于底物结合裂缝催化亚位点+2。 Tfa的7个突变子中，除D219A没有活性以外，其余突变子均有活力。野生酶Tfa的最适温度为60℃，而六个突变子的最适温度有着5至15℃不同程度的下降。而在最适pH方面，Tfa和K222R的最适pH为7.5;其余突变子的最适pH有着5至10个单位的下降。H223Q的比活力是唯一比Tfa高的突变子，升高了3.8％，其余突变子均下降超过40％以上，同时所有突变子的Vmax值皆比Tfa要降低。在Km值方面，H223L和H223D比Tfa的Km值降低了20％以上;K222R几乎没变，Y247A、H223Q、K222T和Y247A均升高34％以上。在产物生成方面，所有酶的麦芽三糖的含量皆提高，所有突变子的麦芽糖含量都低于Tfa。 Sva的突变子H220Q的最适pH与Sva一致都是7.0，但H220Q的最适温度45℃比Sva降低了10℃。H222Q的Km值比Sva升高了16％，比活力增长了17％，Vmax相差不大。Sva的水解淀粉麦芽糖产量高达76％，而H223Q的麦芽糖含量比Sva低12％，麦芽三糖则是Sva的1.8倍。反应相同时长的麦芽糊精有比淀粉水解更彻底的趋势。用750U的糖化酶、Sva和H220Q分别与900g淀粉反应48h后，糖化酶生成了8.031g葡萄糖，Sva得到了0.239g的葡萄糖、3.951g的麦芽糖和2.994g的麦芽三糖，H220Q产生了0.150g的葡萄糖、2.647g的麦芽糖和2.540g的麦芽三糖。