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电化学生物传感器是一种能够将电化学传感和生物分子特异性识别相结合的生物传感装置,拥有灵敏度高、检测时间短、检测便利等优点。其中,现场原位、快速、多元同时测定是研究的热点和发展的方向。本研究主要利用酶催化法,设计双通道普鲁士蓝（PB）修饰电极,结合小型便携式智能恒电位仪,实现了在检测蔬菜中有机磷农药残留以及血液中糖化血红蛋白和糖化血清蛋白同时检测方面的应用。具体如下:首先,在DSPE上,用电沉积法修饰PB,并用Nafion溶液固定乙酰胆碱酯酶,制得可用于检测有机磷农药的电化学生物传感器,并通过扫描电镜等对其结构和形貌特征进行了表征。用PB电极同时测定乙酰胆碱酯酶无抑制与有抑制对硫代乙酰胆碱催化的电流强度,根据电流信号的差别来计算有机磷农药的浓度。实验表明,在最佳条件下（pH6.9,工作电势0.2V,酶修饰量2.5μL,抑制时间15 min）,酶抑制率和有机磷农药浓度的负对数在10-7到5×10-6 g/mL浓度内呈线性相关,检出限为10-77 g/mL。同时进一步对三种农药模拟样品进行测定,验证了方法的可行性。其次,将双通道PB电极用于检测果糖缬氨酸,建立间接同时检测糖化血红蛋白和糖化血清蛋白的浓度的方法。并对实验条件进行优化,确定pH 7.5,工作速率100 mV/s,酶含量4μL,作用时间5 min为最优实验条件。在最佳实验条件下,果糖缬氨酸浓度和H2O2浓度的电流信号呈现良好的线性关系,检出限为0.1 mmol/L。同时对模拟样品中的糖化血红蛋白和糖化血清蛋白的含量进行测定,验证了方法的可行性。最后,因为PB电极在碱性条件下不稳定,故选择三羟甲基氨基甲烷对PB电极进行改性,增加了修饰后的电极在中性甚至碱性条件下的稳定性,并采用扫描电镜、红外光谱等方法对其形貌、结构等进行了表征。采用改进后的电化学生物传感器对果糖缬氨酸的浓度进行检测,并对pH值,电极修饰方法等进行考察,探究了不同条件下该方法的最佳电流响应。