【摘 要】
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目的:基于各组大鼠转录组测序结果,从整体水平探讨NCALD基因功能及豆腐果苷的抗抑郁作用机制。方法:108只大鼠（SD,雄性,2月龄）,体重（200±20g）,一周适应性喂养后,84只大鼠被用来构建CUMS抑郁模型。整个实验分成2部分:第一部分探讨NCALD功能,实验分组为:sham（control+saline）、CUMS+saline、CUMS+AAV、CUMS+AAV-siNCALD。第二部
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目的:基于各组大鼠转录组测序结果,从整体水平探讨NCALD基因功能及豆腐果苷的抗抑郁作用机制。方法:108只大鼠（SD,雄性,2月龄）,体重（200±20g）,一周适应性喂养后,84只大鼠被用来构建CUMS抑郁模型。整个实验分成2部分:第一部分探讨NCALD功能,实验分组为:sham（control+saline）、CUMS+saline、CUMS+AAV、CUMS+AAV-siNCALD。第二部分探讨豆腐果苷的作用机制,实验分组为:sham（control+saline）、CUMS+saline、CUMS+HEL+saline、CUMS+HEL+AAV、CUMS+HEL+AAV-NCALD。通过侧脑室注射生理盐水、AAV病毒和灌胃给予豆腐果苷、生理盐水方式,实现NCALD基因沉默、过表达或药物治疗。利用大鼠行为学指标的变化评价大鼠抑郁状态（体重、OFT、FST和SPT）;ELISA检测大鼠海马和血清中的炎症因子水平:IL-6、IL-1β、TNF-α;Western Blot方法检测大鼠海马中的IKKβ、IL-6、IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS、IкBα、p-IкBα、p-IKKβ和NF-кB p65（胞浆和胞核）的表达含量。结果:进行适应性饲养后,建模之前大鼠的各项行为指标差异均没有统计学意义（P>0.05）。6周刺激构建CUMS模型,CUMS模型大鼠中的体重数值、旷场实验（大鼠运动总路程、穿越象限格子数、前脚直立次数）以及蔗糖偏嗜度中的指标与正常组大鼠的行为学指标相比均减少（P<0.05）,CUMS模型大鼠强迫游泳的静止时间高于正常组大鼠静止时间（P<0.05）。病毒沉默NCALD后,sham组与CUMS+saline组相比,CUMS+saline组中体重数值、旷场实验中大鼠运行总距离、蔗糖偏嗜度、穿越象限格子数、前脚直立次数均低于AAV-siNCALD组的相应指标（P<0.05）;CUMS+saline组中强迫游泳实验中的不动时间高于AAV-siNCALD组的相应指标（P<0.05）。CUMS+saline组中细胞浆中IL-6、IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS、p-IкBα、p-IKKβ和细胞核内NF-кB p65的含量明显高于AAV-siNCALD组中的含量（P<0.05）;而CUMS+saline组细胞浆中的IKKβ、IкBα和NF-кB p65的表达低于AAV-siNCALD组中的表达（P<0.05）。CUMS+saline组中的各项指标与CUMS+AAV中的各项指标在统计学上无意义（P>0.05）。豆腐果苷灌胃治疗和过表达NCALD基因后,CUMS+saline组与CUMS+HEL+saline组相比,CUMS+saline组中细胞浆中IL-6、IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS、p-IкBα、p-IKKβ和细胞核内NF-кB p65的含量明显高于CUMS+HEL+saline组中的含量（P<0.05）;而CUMS+saline组细胞浆中的IKKβ、IкBα和NF-кB p65的表达低于CUMS+HEL+saline组中的表达（P<0.05）。有趣地是,过表达NCALD可以升高豆腐果苷降低的IL-6、IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS、p-IкBα、p-IKKβ和细胞核内NF-кB p65的含量以及降低豆腐果苷升高的细胞浆中的IKKβ、IкBα和NF-кB p65含量（P<0.05）。同样地,CUMS+HEL+saline与CUMS+HEL+AAV组两组的数值在统计学上无差异（P>0.05）。结论:1、CUMS模型中大鼠的体重数值、蔗糖偏嗜度、强迫游泳中不动时间和旷场实验中大鼠的运行总距离、穿越象限格子数、前脚离地次数减少;炎症指标（COX-2、iNOS、IL-6、IL-1β、TNF-α）提高;胞浆中IKKβ、IкBα和NF-кB p65含量降低、胞浆p-IкBα、p-IKKβ和胞核中NF-кB p65的表达含量增多。2、沉默NCALD和豆腐果苷均可以改善CUMS模型大鼠中的各项指标。3、豆腐果苷通过NCALD/IKKβ/IкBα/NF-кB p65信号通路改善大鼠抑郁症状和炎症指标。
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