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目的：1．建立大鼠变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）动物模型2．检测TLR2和TLR4亚型在正常及模型大鼠鼻粘膜上的表达情况3．探讨AR发病中TLR-NF-κB信号通路的可能机制4．探讨不同浓度Toll样受体4激动剂LPS诱导NF-κBp50高表达对AR发病的影响5．培养鼻粘膜上皮细胞并检测TLR4、NF-κBp50的表达6．应用培养的鼻粘膜上皮细胞，探讨LPS诱导NF-κBp50高表达的作用7．初步探讨雷公藤多甙干预变应性疾病的可能机制方法：1．通过卵清蛋白OVA(0.3mg/1mL/只)全身腹腔注射及局部喷鼻致敏，建立大鼠变应性鼻炎动物模型，HE染色鼻粘膜组织形态学改变及鼻腔、鼻粘膜组织嗜酸性粒细胞、中性粒细胞数计数含量，ELISA酶联免疫吸附测定法检测组织IgE水平，并行行为学评估动物模型。2.应用脂多糖LPS及肽聚糖PGN局部喷鼻干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR检测各组鼻粘膜组织TLR2和TLR4的表达。3.施加脂多糖LPS局部喷鼻干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR检测各组鼻粘膜组织细胞因子IL-4、IFN-γ、TLR及NF-κB p50的表达。4.应用不同浓度脂多糖LPS局部喷鼻干预，免疫组织化学染色法和或Real-Time PCR、Western-Blot检测各组鼻粘膜组织IL-4, IFN-γ, TLR，IgE及NF-κB p50的表达。5.采用差速贴壁法并施加条件限定培养基，分离纯化并培养大鼠鼻粘膜上皮细胞，免疫细胞化学染色鉴定细胞类型并判断其纯度。6.应用培养的大鼠鼻粘膜上皮细胞，施加卵清蛋白OVA及脂多糖LPS干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR检测各组鼻粘膜培养细胞的TLR及NF-κB p50的表达。7.通过施加雷公藤多甙干预，检测雷公藤多甙对TLR、NF-κB的表达及细胞因子Th1/Th2平衡的影响。实验的数据应用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理，计量资料以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。结果：1．通过卵清蛋白OVA(0.3mg/1mL/只)全身腹腔注射及局部喷鼻致敏，模型组Wright’s染色显示模型组大鼠鼻粘膜组织粘膜增厚显著，小血管扩张明显，组织中大量嗜酸性粒细胞浸润，ELISA酶联免疫吸附测定法检测组织Th2细胞因子IL-4及IgE水平较正常组明显升高，变应性鼻炎行为学积分显著高于正常组。2．应用脂多糖LPS及卵清蛋白OVA局部喷鼻干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR显示各组鼻粘膜组织均有TLR及NF-κB p50的表达，且TLR及NF-κB p50的表达具有相关性。3.应用脂多糖LPS及肽聚糖PGN局部喷鼻干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR检测显示各组鼻粘膜组织TLR2和TLR4的表达相对增强，中性粒细胞含量增多，鼻粘膜炎症反应明显。4.应用不同浓度脂多糖LPS局部喷鼻干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR检测显示各组鼻粘膜组织IL-4, IFN-γ, TLR，IgE及NF-κB p50的表达与LPS浓度具有相关性。NF-κB抑制剂PDTC组NF-κB p50的表达相对抑制，Th细胞因子的表达相对减少。5.采用差速贴壁法分离纯化大鼠鼻粘膜上皮细胞，施加条件限定培养基纯化培养大鼠鼻粘膜上皮细胞，免疫细胞化学染色鉴定细胞类型及其纯度可达90％以上。6.应用培养的大鼠鼻粘膜上皮细胞，施加卵清蛋白OVA及不同浓度脂多糖LPS干预，免疫组织化学染色法和Real-Time PCR检测各组鼻粘膜培养细胞均有TLR及NF-κB p50的表达，且均有浓度相关效应。PDTC组NF-κB p50的表达相对减少，Th1/Th2细胞因子的比例较模型组增大，IgE的表达相对减少。7.雷公藤多甙降低TLR及NF-κB p50的表达，IL-4, IFN-γ表达均减少，Th1/Th2细胞因子的比值较模型组明显减小，IgE的表达相对减少。结论：1.通过OVA全身多次基础致敏、局部喷鼻激发能够成功地建立大鼠变应性鼻炎的动物模型。2．大鼠鼻粘膜组织TLR有TLR2和TLR4亚型的分布，正常鼻粘膜有较高的TLR2亚型的分布；TLR4亚型在AR发病中变化明显，对变应性鼻炎的发病发挥重要诱导作用。3．TLR在AR的发病发病中发挥诱导作用，变应原可能通过TLR-NF-κB信号通路诱导变应性疾病的发生发展。4． Toll样受体4激动剂LPS可诱导NF-κBp50的高表达，具浓度相关效应；高浓度LPS可诱导NF-κBp50的高表达，影响Th1/Th2平衡，相对抑制IgE的表达，产生免疫偏移作用，对AR发病有一定的影响。5．采用差速贴壁法可分离纯化大鼠鼻粘膜上皮细胞，施加条件限定培养基可纯化培养大鼠鼻粘膜上皮细胞。6．在成功培养的鼻黏膜上皮细胞，高浓度Toll样受体4激动剂LPS可诱导NF-κBp50的高表达，影响Th1/Th2平衡，产生免疫偏移作用，对AR发病有一定的影响。7.雷公藤多甙降低TLR的表达，调节TLR及NF-κB p50的表达，纠正Th1/Th2细胞因子的比例，降低IgE的表达，影响变应性鼻炎的发生发展。