黄曲霉毒素B1通过死亡受体通路诱导肝细胞氧化应激和凋亡的研究

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黄曲霉毒素由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的代谢产物,对人类和动物的健康造成影响。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)是研究最广泛的致癌物质,产生肝脏毒性和遗传毒性,影响多种动物的免疫系统功能。AFB1是通过引起的肝细胞凋亡和干扰细胞酶活性来造成肝功能障碍。有研究表明在肝脏中,AFB1引起细胞凋亡是通过死亡受体通路引起的。但关于AFB1通过死亡受体途径诱导肝细胞凋亡的机制尚不清楚。鉴于此,本研究通过解剖学、组织学、超微结构、流式细胞术和荧光定量PCR等研究方法分析探讨AFB1诱导肝细胞凋亡的死亡受体通路。试验选用156只1日龄科宝健雏,购于温江正大畜禽有限公司,随机分为两组,每组3个重复,每个重复包含26只。对照组饲喂基础日粮(AFB1<0.001 mg/kg),实验组饲喂含AFB1的基础日粮(AFB1=0.601 mg/kg)。试验周期为21天。本研究的结果如下:组织病理学检查结果表明,AFB1组中肝脏出现轻中度水肿和脂肪空泡变性,并发生胆管增生。此外,用透射电子显微镜观察发现AFB1组中细胞核呈不规则、分散以及核凝聚,且肝细胞线粒体、内质网出现肿胀。抗氧化试剂盒对生化指标检测结果表明,与对照组比较,AFB1组中CAT(过氧化氢酶)、GSH Px(谷胱甘肽过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)和羟基自由基的清除均明显降低(P<0.05或P<0.01),MDA(丙二醛)均显著升高(P<0.05或P<0.01),GSH(谷胱甘肽)明显降低(P<0.05或P<0.01)。流式细胞仪分析结果表明,揭示了 AFB1组中肝脏凋亡的细胞显著性增多(P<0.05或P<0.01)。荧光定量PCR分析结果表明,AFB1组中死亡受体相关因子 Fas、TNFR1、FADD、TRADD、TRAF2、Caspase 10、caspase 8、caspase 9 和 caspase 3 显著地上调(P<0.05 或 P<0.01),而 XIAP、Bcl-2 的mRNA表达量显著降低(P<0.05或P<0.01)。总之,本次试验的综合研究表明,日粮中添加AFB1可以影响肝脏的组织病理、超微结构、生化指标变化,增加雏鸡肝细胞的凋亡,诱导死亡受体相关基因表达的改变。此外,本研究为更好地探讨AFB1通过死亡受体途径诱导肝细胞凋亡的分子机理提供参考依据,最终为降低AFB1对雏鸡的影响提供新的思路。
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