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黑皮鸡枞菌（Oudemansiella radicata）多糖具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等活性,但其对四氯化碳（Carbon tetrachloride,CCl4）诱导的小鼠慢性肝损伤的保护效应及其作用机制研究较少。本课题利用单因素试验和响应面分析（Response surface methodology,RSM）优化黑皮鸡枞菌菌丝体多糖（Mycelia polysaccharides of O.radicata,MPO）的提取条件,热水浸提法和醇沉法获得MPO,分离纯化得到MPO-W,对其进行结构和体外抗氧化能力测定,并利用CCl4诱导的慢性肝损伤小鼠模型,初步探索MPO-W的肝损伤修复机制,为寻找和发现天然保肝护肝药物提供理论参考。主要研究结果如下:（1）MPO的提取条件优化。最优提取条件为提取温度90℃、提取时间3.37h、加水体积27.93mL和pH 6.96,理论得率为1.64%。考虑操作方便,提取条件设定为提取温度90℃、提取时间3.5h、加水体积30mL和pH 7,MPO的理论得率为1.62%,实际得率为1.67±0.14%。（2）MPO的分离纯化。脱色素和去蛋白后的MPO通过DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析进一步分离纯化,获得主要组分MPO-W,且其纯度达到91.73±2.63%。（3）MPO-W的物理化学性质及结构测定。物理化学性质显示,MPO-W是一种浅土黄色粉末状物质,不溶于大多数有机溶剂,热稳定性好,且膨胀度、保水能力和持油能力分别是134.81±3.93%、4.55±0.29%和2.38±0.05%。气质联用（Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）和高效凝胶渗透色谱（High-performance gel-permeation chromatography,HPGPC）分析表明,MPO-W的分子量为1.30×105Da,主要由岩藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖构成,摩尔比为8.67:37.89:35.98:16.60。根据傅里叶变换红外光谱（Fourier transform-infrared spectroscopy,FT-IR）、甲基化分析、核磁共振（Nuclear magnetic resonance,NMR）结果表明,MPO-W主要由Manp-（1→、→3）-Fucp-（1→、→2）-Manp-（1→、→4）-Glcp-（1→、→6）-Galp-（1→和→2,6）-Manp-(1→六种糖残基组成,且具有α和β构型的吡喃糖。扫描电镜及刚果红试验结果显示,MPO-W分子间作用力大,结构紧密,且不具有三维螺旋空间构象。（4）MPO-W的体外抗氧化能力测定。MPO-W对羟基、超氧阴离子和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基具有一定的清除能力,且还原力较强。（5）MPO-W对CCl4诱导小鼠慢性肝损伤的修复作用。（1）对于CCl4代谢酶,MPO-W能较好地改善肝组织中细胞色素P4502E（Cytochrome P450 2E1,CYP2E1）的活性和mRNA表达。（2）对于肝损伤程度,慢性肝损伤小鼠血清中肝损伤标志酶的活性明显被MPO-W抑制,且小鼠肝组织病理学切片也显示MPO-W的干预能够减轻肝损伤程度。（3）对于肝脂和血脂代谢紊乱,MPO-W可有效地调控慢性肝损伤小鼠肝组织中腺苷酸活化蛋白激酶-α（Adenosine monophosphate activated protein kinase-α,AMPKα）和甾醇调节元件结合蛋白-1c（Sterol regulatory element binding proteins-1c,SREBP-1c）减少TC和TG堆积,也改善了血脂代谢紊乱。（4）对于体内抗氧化能力,MPO-W明显提升慢性肝损伤小鼠肝组织中总抗氧化能力（Total antioxidant capability,T-AOC）及抗氧化酶活性,并降低丙二醛（Malondialdehyde,MDA）和脂质过氧化物（Lipid peroxide,LPO）含量;抗氧化相关蛋白和荧光探针DHE标记的ROS分析表明,MPO-W显著上调血红素加氧酶-1（Heme oxygenase-1,HO-1）和红系衍生的核因子2相关因子2（Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）的蛋白和mRNA表达,降低细胞中ROS水平,进一步证明MPO-W具有较好的抗氧化活性。（5）对于抗纤维化能力,MPO-W明显下调转化生长因子β1（Transforming growth factorβ1,TGFβ1）的蛋白和mRNA表达,从而抑制肝星状细胞活化;马森（Masson）和天狼猩红（Sirius red）染色及羟脯氨酸（Hydroxyproline,Hyp）分析结果也支持MPO-W的抗纤维化作用。（6）对于炎症反应,MPO-W有效地遏制IκB激酶（IκB kinase,IKK）和核转录因子p65（Nuclear factor-κB p65,NF-κB p65）磷酸化及核因子κB抑制蛋白-α（Inhibitor of NF-κB-α,IκBα）降解,阻止NF-κB激活,减少炎症因子分泌,从而达到抗炎症目的。（7）对于细胞凋亡,MPO-W显著上调抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）,下调促凋亡蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3）,且Tunel法荧光标记的凋亡细胞数也说明MPO-W具有抑制细胞凋亡作用。（8）对于细胞自噬,MPO-W明显降低自噬相关蛋白-5（Autophagy-related protein-5,ATG5）、ATG7的蛋白表达及微管相关蛋白-II（Microtubule associated protein 1A/1B-light chain 3-II,LC3-II/LC3-I）的比值,表明MPO-W具有缓解细胞自噬的能力。体内试验结果说明,MPO-W能够通过调控抗氧化、纤维化、炎症、细胞凋亡、细胞自噬中相关分子机制,修复CCl4诱导的慢性肝损伤。