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鱼油中的二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)多不饱和脂肪酸具有多种生物活性,例如调节血脂、改善记忆力、调节脂代谢、增强免疫等功效。目前由于多数针对于非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver diseases,NAFLD)治疗的研究都是采用EPA和DHA的混合物如鱼油胶囊或者含有的鱼油饮食而不是单一的脂肪酸EPA和DHA,所以仍旧不清楚EPA和DHA对NAFLD是否有独立的生理活性而,这两种多不饱和脂肪酸EPA和DHA可能对NAFLD产生截然的不同的效果。并且这些研究大部分采用的的是市场上比较多的乙酯型或者游离型的n-3多不饱和脂肪酸(Omega-3 polyunsaturated fatty acids,n-3PUFA),但乙酯型的吸收率仅为2l%,游离型的EPA和DHA虽然吸收率为95%,但容易氧化,很不稳定,且对消化道有刺激作用。甘油酯型是鱼油的天然存在形式,符合人体吸收的油脂形式,其人体吸收率明显高于乙酯型鱼油,吸收可以达到60%左右,性质相对稳定。本实验室采用酶法制备了高纯度甘油三酯型EPA(trieicosapentaenoyl glycerol,tri EPA)和DHA(tridocosahexaenoyl glycerol,tri DHA),两者纯度纯度都达到了80%。本论文以上两种高纯度鱼油为研究对象,采用小鼠为动物模型探究了其对NAFLD的调节作用,并探讨其治疗机制。通过在饲料中添加1%的胆固醇和20%的饱和长链脂肪酸建立小鼠NAFLD的模型,研究tri EPA和tri DHA对小鼠非酒精性脂肪的治疗作用。结果显示,tri EPA和tri DHA补充高脂饲料诱导的NAFLD模型小鼠8w后,显著降低了小鼠的肝重系数、血清谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(Aspartate transferase,AST)活性,血清游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)含量,显著降低胰岛素指数,显著降低了肝脏总甘油三脂(Total triglyceride,TG)和总胆固醇(Total cholesterol,TC)水平,显著降低肝脏的脂变程度。由此,tri EPA和tri DHA能够减轻胰岛素抵抗,减少肝脏脂肪堆积,NAFLD有积极的预防和改善作用,而两者在这些方面并未出现显著性差异。维生素E(α-生育酚,a-tocopherol)作为天然的抗氧化剂能够清除自由基和抑制脂质过氧化作用。为进一步加强tri EPA和tri DHA对小鼠NAFLD脂肪肝的治疗效果,在本次研究中小鼠额外加入维生素E。结果显示,补充8w后,相对于tri EPA,tri DHA对肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的提高更明显,具有更好的抗氧化能力。相对于n-3 PUFA,n-3 PUFA+维生素E补充液对小鼠GSH、GSH-Px和SOD(超氧化物歧化酶,Superoxide dismutase)均有显著提高,ALT和AST显著降低。在其他指标上未存在显著性差异。单独维生素E的补充并未改善以上指标而与模型组较为接近,但维生素E可与n-3 PUFA协同治疗NAFLD。进一步了解n-3 PUFA对小鼠NAFLD的治疗机理,本论文研究了tri DHA和tri EPA对小鼠肝脏脂代谢相关基因的表达以及脂肪酸组成的的影响。RT-PCR结果显示,补充tri EPA和tri DHA的小鼠,肝脏SREBP-1c表达量显著下降,但PPARα并未显著性升高,说明tri EPA和tri DHA并未在PPARα转录水平上其改善作用,但有研究显示PUFA主要是通过结合PPARα,改变其构象使其对应的调控的转录产物提高。肝脏脂肪酸组成分析显示,肝脏脂肪酸中多不饱和脂肪酸总量明显提高,而花生四烯酸含量显著下降。tri EPA和tri DHA补充组的DHA含量显著高于EPA含量,因此tri EPA和tri DHA可通过调节肝脏脂肪酸组成和脂代谢相关基因的表达来改善小鼠NAFLD,而EPA可能主要作为DHA的合成的前体。