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1 人类卵泡形态学特点 通过胶原酶消化卵巢组织碎片的方法，对人卵巢中原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡的大小及在卵巢皮质中的分布、卵泡数目变化与妇女年龄变化之间的关系和卵泡生长闭锁的动态变化进行了观察、比较和分析。结果表明：原始卵泡和初级卵泡直径分别分布在30～64μm和60～89μm之间；原始卵泡直径＜35μm仅占2.32％，直径在40～54μm之间的达76％以上；初级卵泡直径在65～84μm之间的达80％以上。随年龄增加，卵泡数下降，20～岁组、30～岁组和40～岁组中1/4个卵巢所含卵泡数分别为631.43±225.39个、303.17±254.61个和70.38±37.99个；三组相比，卵泡数有显著性差异（P＜0.01）；50岁以后卵巢中的卵泡数则更加减少，仅存13.5±9.67个，较前三组差异更为显著（P＜0.001）。不同年龄妇女卵巢皮质中的卵泡分布不同，20～岁组妇女的卵泡呈密度一致、均匀分布；30～岁组妇女逐渐出现无卵泡区，而卵泡区的卵泡呈现簇团状分布；40～岁组妇女无卵泡区渐渐增多并最终连成大片的区域，仅见到少量卵泡散在其中。在绝经后的妇女卵巢皮质中，绝大部分是无卵泡的区域，仅能发现个别卵泡。一般说来，人类卵巢皮质的最外层分布有大量的原始卵泡，在原始卵泡层下1/3逐渐有初级卵泡出现，为原始卵泡与初级卵泡混合的区域，在初级卵泡的下方有数目不等的次级卵泡，而早期腔卵泡则位于更下方。原始卵泡及初级卵泡周围无血管生长，次级卵泡及腔卵泡周围有血管网存在，在一主干血管的分支上往往有数枚生长卵泡依附，呈团簇状或葡萄状。2 人卵泡分离方法研究 比较机械吹打、胶原酶消化、胶原酶消化并显微解剖及显微解剖四种卵泡分离方法。机械吹打、胶原酶消化、胶原酶消化并显微解剖完成1/4卵巢的卵泡分离时间分别为44.56±6.26min、48.25±4.33min和185.38±35.91min；获取的卵泡分别为5.19±2.16个、4.44±1.59个和33.25±12.89个；前二组分离到的绝大多数为原始卵泡。第三组可获得原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡，分离到的卵泡数量较前二组多（P＜0.01），但分离时 施旭东：人类拥母细胞的体外发胄与存渭卵泡的形态学研究间较前二组显著延长叩＜0．01）。分离到的卵泡体外生长良好，次级卵泡有雌h醇u／产生。3 人卵泡体外培养研究 在对照组及阳H浓度分别为 0．5 IU／mL．！．0 IU／IuL和 2．0 IU／mL时，原始卵泡存活天数分别为 4．41士二．96d、4．引土1石6d． 4．54土！．96d和4．25土1．83d，各组之间无显著性差异o＞0刀5卜初级卵泡存活天数分别为4石9土2．02d、4．13 ti．96d、4．36 iZ．17d和4．4712．07d，各组之间无显著性差异 （P＞0．05）。次级卵泡存活天数分别为2．80土1．69d、5．36土0．63d、5．听土2．50d和8．13土4．19d，卵泡体外存活时间与FSH浓度呈正相关关系，有h枚卵泡存活达22天以上，形态正常，体积增大。原始卵泡在体外培养存活天数＞sd为52．94％（if7／22卜 初级卵泡在体外培养时存活天数＞sd为53．23o（33／62），二者无显著性差异u ＞0．05）。 在对照组和阳H浓度分别为 0．5 IU／mL、1．0 IU／mL和 2．0 IU／InL时，原始卵泡增大的比例分别为3．23％、0、5．88％和4．35％；初级卵泡增大的比例分别为 0、14．29％、14二9％和 门二 1％；次级卵泡增大的比率分别为20．00O、35．71o、60．00o和sl．25％。与对照组相比分别为无显著性差异 （P＞0．05）、有显著性差异（P＜0．05）和有极其显著性差异（P＜0．01），卵泡增大的比率与 FSH浓度呈剂量依赖性关系。在 FSH 2．0 IU加l 的试验组中，有二例在5天的培养过程中，其直径分别从200卜m、＊0卜m增大到220 n m、130 u m，并在培养的第 9天排出卵母细胞，相差显微镜下显示GVBD，表明己出现了减数分裂的恢复，基本发育成熟。4 垂体促性腺激素对卵泡类固 素分泌的影响 次级卵泡在对照组及田H浓度分别为 0．5－I毗、l．0 IU／mL和 2．0IU加L的培养液中培养时，E。分泌量分别为49．94土20．91us／mL、108．63士41．06gg／mL、315，53土93．39urn＊L和438．24土187．6lin／mL，各组相比有显著性差异（P＜O．OI）；T分泌量分别为103．75土38．58 p令mL、189．86士79．14pgagaL、387．72土！64．sipymL和484．47土16641pg／mL，备组相比较，有极其显著性意义o功．O＊）。 次级卵泡在对照组、实验 1组几H浓度为 0．05 IU砌L）和实验＊组（LH 浓度为 0。10 IU／mL）培养时，E。的分泌量分别为 438．24士187．6lPg／mL、431．71士141．76Pg／。卜和389．26士106．93Pg／mL。实验＊组民 2 拘 要 的分泌量较对照组和实验1组明显下降叩＜0刀5）。卵泡T的分泌量在对照 组、实验 1组和实验 11组分别为 484．47 t 166．4lpg／mL、323．20 t