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众所周知,生活中应激无处不在,无法避免。随着社会的快速发展和自然灾害的频繁发生,人们面临的压力(应激)越来越大,研究表明身兼多种角色于一身的女性,更容易受到应激相关疾病的影响。从繁殖学的角度讲,应激可能会造成生殖内分泌紊乱或退化性疾病和女性早衰。虽然有人证明急性应激能够降低小鼠卵母细胞发育能力,但研究长期重复应激对卵母细胞影响的较少。我们将重复束缚应激不同天数或不可预料应激后的小鼠超数排卵后研究卵母细胞发育能力、焦虑行为、激素水平等指标。 结果如下: (1)重复束缚应激8天、15天、23天的小鼠卵母细胞体外发育能力显著降低。重复束缚应激4天和不可预料(4×1)应激的小鼠卵母细胞体外发育能力没有显著降低,但不可预料(4×2)应激对卵母细胞体外发育能力显著降低。 (2)重复束缚应激23天期间,应激组小鼠的血清皮质醇(酮)一直高于对照组,而且差异显著。而应激4天过程中,不可预料应激(4×1)组、不可预料应激(4×2)组和重复束缚应激组小鼠的焦虑行为都显著高于对照组,而且不可预料应激(4×2)组明显高于束缚应激组。 (3)重复束缚应激23天期间,应激组小鼠的焦虑行为一直高于对照组。而应激4天过程中,不可预料应激(4×1)组、不可预料应激(4×2)组和束缚应激组小鼠的焦虑行为都显著高于对照组,而且不可预料应激(4×2)组明显高于束缚应激组。 (4)在应激4天过程中,重复束缚应激和不可预料应激(4×2)小鼠血清中CRH含量一直显著高于与对照组,而且不可预料应激(4×2)组显著高于重复束缚应激组。卵巢中CRH含量的检测结果与血清中的结果一致。 (5)重复束缚应激23天期间,对照组小鼠体重不断升高,应激组小鼠体重有下降的趋势。在应激4天过程中,重复束缚应激和不可预料(4×2)应激的体重变化明显高于对照组。 (6)将取出的GV期卵母细胞在成熟199中培养24h后,应激小鼠体外成熟卵母细胞胞质中总的谷胱甘肽(GSX)水平与对照组没有明显差异,但是还原型谷胱甘肽(GSH)水平发生显著下降,并且不可预料(4×2)应激组显著低于重复束缚应激组;应激组中氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平显著升高,并且不可预料(4×2)应激组显著高于重复束缚应激组。 总之,我们的结果表明,在小鼠重复束缚应激23天期间,小鼠体重显著降低,皮质醇(酮)和焦虑行为也增高,对小鼠卵母细胞的发育能力的影响也逐渐增加。在应激4天过程中,不可预料(4×2)应激对小鼠的皮质醇水平、焦虑行为、CRH水平、卵母细胞氧化应激水平的影响都高于重复束缚应激小鼠,而且不可预料(4×2)应激能显著降低小鼠卵母细胞的发育能力。可见重复束缚应激通过对有腔卵泡的形成及其之前生长过程的影响来降低卵母细胞发育能力是一个积累的过程,特别是HPA轴产物的积累。