Caspase-3表达强度评价齿科合金生物相容性的实验研究

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目的新材料应用于人体前必须经过全面的生物学检测,现利用凋亡相关因子caspase-3的表达强度辅以时间梯度分析自制齿科合金生物相容性,以期使之应用于临床,使国内产品得以推广发展。并尝试从凋亡的角度,在分子水平上对口腔材料生物相容性检测方法做一定补充;探讨caspase-3表达强度与口腔材料生物相容性的关联,以期使之成为评价口腔材料生物相容性指标之一。材料与方法1、细胞培养L929细胞用含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养基在37℃、5%CO2的培养箱中培养并传代。2、细胞形态学检测设立阴性对照组及实验组(镍铬合金组、银钯合金组、钴铬合金组、2号合金组、3号合金组),用6种液体分别培养L929细胞48h后,在荧光显微镜下对活细胞、凋亡细胞、坏死细胞进行观测。3、Caspase-3分光光度法检测设立阴性对照组及实验组(镍铬合金组、银钯合金组、钴铬合金组、2号合金组、3号合金组),用6种液体分别培养L929细胞4h、7h、24h、48h后,收集细胞,提取蛋白,染色后用酶标仪测定OD值,计算caspase-3活化度。结果1、各实验组加样培养48h后细胞形态。荧光显微镜下观察,可见各组细胞量上有差异,各组内均有大量凋亡细胞,镍铬合金组内可见橙色的坏死细胞或凋亡晚期细胞。2、6种液体作用下caspase-3活化情况各实验组caspase-3活性比较有差异(P<0.05)。Caspase-3活化度大小,由高到低:钴铬合金组>2号合金组>3号合金组>银钯合金组>镍铬合金组。3、4h、7h、24h、48h点caspase-3活化情况各时间点caspase-3活化度比较有显著性差异(P<0.01),活化度由大到小依次为:4h、48h、7h、24h。结论1、各实验组生物相容性由好到差依次为:钴铬合金与2号合金>3号合金>银钯合金>镍铬合金。2、2号合金与3号合金可考虑应用于临床。3、凋亡相关因子caspase-3在时间梯度的辅助下有可能成为评价金属材料生物相容性的参考指标之一。
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