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海雀稗(Paspdumvaginatum)是禾本科(Gramineae)雀稗属(Paspalum)的一种重要盐生植物,在美国南部、非洲、澳大利亚及太平洋沿岸等国家均有自然分布,在中国主要分布于广东、海南、云南以及台湾等地。海雀稗种植资源尤其是中国的资源研究甚少,目前在国内推广的海雀稗品种都是从国外引进的,虽然坪用质量较高,抗盐性较强,在我国沿海乃至内陆地区得到较好的推广应用,但是由于其综合抗性较差,在生产中存在很多问题没有得到解决。为此,本文首次通过形态特征和分子标记手段对从海南、广东等地收集的国内海雀稗野生种质资源及国外引进的海雀稗品种进行遗传多样性研究,并利用叶片电解质外渗法和匍匐茎恢复生长试验,对国产海雀稗种质资源和海雀稗引进品种进行抗寒性鉴定,同时对其坪用质量进行评价,最后以引进品种 ’Seadwarf、’Adalayd,、’SeaIsle2000’、’Salam’、’Seaspray’、’Platinum TE,为对照,采用SRAP分子标记技术构建其DNA指纹图谱,对坪用价值优良及抗寒性强的新品系进行鉴定,以选育出适合我国本土的优质抗寒海雀稗新品种,满足我国沿海开发生态建设的需要。有关研究结果如下:1海雀稗种质资源遗传多样性研究1.1海雀稗种质资源形态多样性研究通过对42份海雀稗种质资源的6个营养性状和7个生殖性状进行观测研究,采用SPSS13.0软件对营养和生殖性状的数据进行统计分析。结果表明,海雀稗种质资源在13个外部性状上遗传差异显著,变异最大的为草层高度与密度,变异系数分别为30.96%和30.94%。变异最小的为花序宽度和小穗长度,变异系数为11.11%和7.58%。根据形态特征可将参试的海雀稗种质资源及其品种分为六个形态类型。1.2海雀稗SRAP-PCR分子标记体系优化及其引物筛选以国内收集的海雀稗野生资源P18-2、P55和国外引进的海雀稗品种’SeaIsle2000’和’Adalayd’的叶片DNA为模板,采用L9(34)正交实验设计,对影响海雀稗SRAP-PCR反应的Mg2+,dNTP,引物,TaqDNA聚合酶的用量进行优化,确立适合海雀稗的SRAP-PCR最佳反应体系。结果表明:海雀稗SRAP-PCR最佳反应体系为10×PCR buffer 1 μL、模板 DNA 50 ng、Mg2+2.5 mmol/L、dNTP 150 μmol/L、引物 0.4 μmol/L、TaqDNA聚合酶1.5 U,总体积10μL。利用该反应体系从100对引物中筛选出可扩增清晰条带的引物83对,在83对引物中选出多态性丰富的引物44对。1.3海雀稗种质资源多样性的SRAP标记分析通过SRAP(Sequence-Related Amplified Polymorphism)分子标记技术对42份海雀稗种质资源进行多样性分析,结果表明30对引物共扩增出374条可以应用于多样性分析的谱带,多态性比率(PPB)为85.83%(多态性带321条)。6个引进品种的遗传相似性非常高,国内种质资源与国外引进品种遗传相似性很低,通过分子系统聚类法,将42份海雀稗种质资源分为七个类群。2海雀稗种质资源坪用价值评价对42份海雀稗种质资源用9个坪用质量指标进行坪用价值评价,结果表明’Seadwarf的坪用价值最高,综合评分为7.91,排名第二的是’PlatinumTE,为7.82分,国内的品种P55以7.55的高分排名第4。P55综合排名高于’Adalayd’,’Salam’和 ’Seaspray,三个国外品种。P68、P17、P38、P56、P33、P40、P14、P50、P02 这9份种质资源的坪用质量也相对较高。3海雀稗种质资源的抗寒性鉴定采用叶片电解质外渗法和匍匐茎恢复生长试验,对37份国产海雀稗种质资源和6份海雀稗引进品种进行抗寒性鉴定。综合分析两种抗寒性方法的鉴定结果,P49、’Salam’、’Seaspray’、P42、P13、’Adalayd’、P56、P60、P06 叶片的抗寒性较强。P55(1)、P05、P09、P18-2、P37、P27、P55、P28、P29、P33、P54、P30、’Seadwarf’、P68为低温胁迫后恢复能力较强的材料。其中P18-2、P37、P27是综合抗寒性较好的材料。4优质抗寒海雀稗新品系DNA指纹图谱的构建对国内种源中筛选出来的8个优质抗寒海雀稗新品系和6个引进品种,采用SRAP分子标记技术构建其DNA指纹图谱。结果18对引物一共扩增出312条清晰的条带,多态性比率为75%(多态性条带234条)。18对引物中Me7Em1和Me1Em10的扩增图谱可以区分开所有参试材料。