烟草青枯病是由茄青枯劳尔氏菌属的假单胞杆菌(Ralstonia solanacearum)引起的细菌性病害,多发于热带、亚热带烟区,在我国主要是长江流域及其以南烟区,其中以四川、广东、福建、湖南及贵州烟区最为严重,发病重的地块产量损失可达80%以上。传统的化学防治方法成本高、污染重,轮作和微生物防治成为解决此问题的重要方案。其中,微生物防治方法具有无污染、无公害、长效性等优点,能从根本上解决了药剂残留、病原菌抗药性等问题的影响,有利于环境的净化和生态资源的良性循环。本研究针对烟草青枯病菌,主要进行了拮抗真菌的筛选、鉴定、发酵条件优化、发酵液育苗试验及活性产物稳定性的研究。主要研究结果如下：1.采用稀释法从重庆黔江烟区健康土壤中分离到59株真菌。采用滤纸片法进行筛选,获得了对烟草青枯病菌具有较强拮抗活性的2个真菌菌株,编号为3F03和7F06,其抑菌圈直径分别为：10.0mm和9.5mm。经反复平板拮抗试验,抑菌圈直径无明显差异。2.通过对菌株3F03和7F06的形态和培养特征观察、全细胞脂肪酸分析和rDNA ITS序列分析,初步鉴定结果显示：拮抗真菌3F03和7F06分别为烟曲霉(Aspergillus fumigatus)和浅黄新萨托菌(Neosartorya aureola)。3.以菌株3F03和7F06发酵液处理的烟苗生长状况良好,与对照相比,在种子发芽率、苗高、苗重、根长及根重方面都没有显著的变化。其中,稀释10倍的3F03发酵液和稀释100倍的7F06发酵液两个处理有一定程度的促生作用。4.以代谢产物的抑菌活性及产量为指标,初步确定了菌株3F03的最佳发酵条件为：发酵温度28℃、发酵时间96h、接种量5%、装液量50mL／150mL；菌株7F06的最佳发酵条件为：发酵温度28℃、发酵时间120h、接种量3%、装瓶量1OOmL／150mL。5.以不同处理下代谢产物的抑菌活性为指标,测定了菌株3F03和7F06活性产物的稳定性。发现菌株3F03的活性产物的热、pH和紫外稳定性较好,经蛋白酶K和胰蛋白酶处理抑制率仅分别下降了17.0%、14.5%；菌株7F06的活性产物抗紫外线和蛋白酶的能力较强,酸性环境下抑菌活性仅稍有下降,活性产物经80℃以上高温处理后抑菌能力基本丧失。