中药战骨的化学成分、总黄酮提取工艺与抗氧化活性的研究

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战骨(Premna fulva Craib)是马鞭草科豆腐柴属植物,分布于广西西南部、贵州南部、云南等地。目前发现其中主要含黄酮,三萜,酚类物质。由于其具有抗癌,抗炎消肿,镇痛,保护坐骨神经等功效而受到人们重视。本文对战骨的化学成分、总黄酮提取工艺与抗氧化活性进行了研究,主要包括以下的工作:(1)利用液-液萃取法、大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备反相高效液相色谱、制备薄层色谱等手段,从战骨茎皮的醇提物的正丁醇部分和水层部分中分离得到8个化合物,通过理化性质、波谱、色谱等方法鉴定了化合物的结构,这些化合物分别是:无机盐硝酸钾、葡萄糖、邻苯二甲酸二正十一烷基酯、3β,17β-3-羟基-甾烷-5-烯-17,1’-环丁烷基-2’-酮、香草酸、洋芹素、柚皮素和黄酮皂甙6,8-二葡萄糖基芹菜素(vicenin 2),后者首次从战骨中分离得到。(2)综述了战骨化学成分及药理活性的研究进展,及黄酮类物质的分离纯化方法,总结了黄酮对自由基的清除作用与构效关系。(3)研究了总黄酮的提取工艺,用传统索氏提取法及现代提取方法微波萃取法、超声波萃取法、内部汽化法四种不同的提取方法对战骨中的总黄酮进行提取。以纯化的战骨黄酮皂甙vicenin 2作对照品,用紫外分光光度计在282nm测定以上四种方法的战骨提取液的总黄酮含量及回收率,并将现代方法与传统方法进行比较。结果表明:线性范围在2.4~16.8mg/L,R=0.9996。微波萃取法、超声波萃取法、内部汽化法的最优方案的提取率分别为2.07%,1.90%,1.78%,RSD分别为1.40%,1.47%,1.16%,平均回收率分别为100.60%,105.12%,99.92%。索氏提取法的提取率为0.95%。现代提取工艺普遍优于索氏提取法。(4)黄酮类物质的抗氧化活性方面,本实验进行了战骨总黄酮提取物和黄酮单体的脂质过氧化实验。实验表明,总黄酮提取物的抗脂质过氧化效果并不明显,洋芹素,柚皮素的抗脂质过氧化与黄酮浓度呈一定的线性关系,柚皮素和洋芹素的IC50分别为1.45×10-4mol/L,1.26×10-4mol/L。vicenin2的抗氧化效果不明显,在浓度大时还呈一定的促氧化作用。借助理论方法,包括结构活性关系和量子化学计算阐释了这三种黄酮类清除自由基活性的差异。
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