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目的:
研究骨髓间充质干细胞(BMSC)在新型玉米醇溶蛋白(zein)三维多孔支架材料表面的黏附、增殖;评估zein多孔支架材料在体内的生物相容性、生物降解性,探索其作为骨移植替代材料应用于骨组织工程的可能性。
方法:
1. 从人骨髓中分离BMSC,分别进行成骨和成脂方向诱导以验证其多向分化的能力;利用电镜检验BMSC在玉米醇溶蛋白支架材料表面的黏附、增殖。
2. 将单纯zein多孔支架材料或zein多孔支架材料与BMSC的复合物分别移植入裸鼠的双侧股部肌袋中,通过大体观察,X线观察以及标本的组织形态学观察,评价分析zein在裸鼠体内诱导异位成骨的能力。
3. 在兔双侧桡骨骨干中段造成1.5cm的大段骨缺损,分别植入单纯zein多孔支架材料或zein多孔支架材料与BMSC的复合物,通过大体观察,X线观察,Micro-CT扫描以及组织学观察,评价zein多孔支架材料作为骨组织工程替代材料的可能性。
结果:
1.电镜结果显示出zein多孔支架材料具有均一的多孔结构以及良好的孔连通性;BMSC能够在材料表面有效地黏附生长,证明zein多孔支架材料具有良好的细胞相容性。
2.大体观察结果证实了zein多孔支架材料具有良好的组织相容性;X线观察结果和H&E染色结果均显示,单纯zein多孔支架材料仅能诱导少量的新骨生成,而BMSC的加入可以显著增强这种异位成骨作用;此外,H&E染色结果还证明了,在异位成骨作用的过程中一直伴随有小血管的长入。
3.兔大段骨缺损实验中,影像学以及组织学结果均显示出,zein多孔支架材料与兔BMSC的复合物能够有效地促进骨缺损的修复,而单纯的zein多孔支架材料则不具备这种功能。组织学结果则进一步证实,材料不仅呈现出良好的生物相容性以及与骨形成相一致的降解速度,更能够允许骨再生过程中血管的长入。
结论:
1.Zein多孔支架材料在体外培养条件下,能够允许人BMSC的正常黏附生长。
2.Zein多孔支架材料与兔BMSC的复合物,能够在裸鼠体内实现异位成骨,并伴随血管化过程。
3.Zein多孔支架材料与兔BMSC的复合物,能有效地修复兔桡骨大段骨缺损,同时具备良好的降解性和血管化,因而具有临床应用与骨组织工程的潜能。