【摘 要】
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目的：制备抗gremlin1单克隆抗体并对其进行亲和力和特异性的初步鉴定。方法：采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,以紫外吸光光度法测定腹水单抗浓度,间接ELISA法测定腹水单抗效
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目的：制备抗gremlin1单克隆抗体并对其进行亲和力和特异性的初步鉴定。方法：采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,以紫外吸光光度法测定腹水单抗浓度,间接ELISA法测定腹水单抗效价,细胞免疫荧光法及Western blotting法鉴定单抗的亲和力和特异性。结果：本实验制备出7个单抗。腹水单抗浓度为13.7～37.7mg/ml。其中,1D4、1H5、1C9、1A4和1C4腹水的单抗效价均为1：3.2×104以上。经HEECs免疫荧光鉴定,七个单抗的荧光染色均分布于细胞胞质内,其中,1A4抗体的稀释倍数最高。Western blotting显示7个单抗均有位于47KDa左右的特异性条带出现,1A4条带最明显,但也有明显的非特异吸附条带。结论：本实验成功制备7株单抗,其中5株的腹水单抗效价可以满足亲和层析、ELISA等实验要求。7株抗体均与HEECs有较强的亲和力,具有特异性,且其中1A4株特异性最强,但7株抗体都存在非特异性吸附。
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