论文部分内容阅读
目的:胃癌的发生和发展是一个多基因、多因素、多步骤、多阶段的动态顺序演变过程,涉及到多种癌基因的异常激活、抑癌基因的缺失、突变失活及由此引起的细胞增殖失控而恶性转化等肿瘤发生的分子基础。RAS相关家族基因1A(RAS association domain family gene,RASSF1A)是2000年从人类3号染色体短臂上克隆出来的新型候选抑癌基因。RASSF1A基因与RAS的效应基因同源,其编码产物被认为是RAS的效应物,称之为RAS相关区域家族1A基因。在生理状态下,RASSF1A不仅具有促进生长增殖的作用,同时还具有抑制生长、促进细胞凋亡和衰老的功能。RASSF1A在多种实体肿瘤中表达降低,参与肿瘤的发生发展过程。组织蛋白酶L(cathepsin L,CL)是一种可以由肿瘤细胞及其间质细胞分泌的具有降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM)功能的半胱氨酸蛋白酶。CL以酶原的形式贮存于溶酶体中,其底物是胶原、弹性蛋白、纤黏连蛋白,层黏连蛋白等细胞外基质蛋白,与细胞连接关系密切。CL通过多种机制影响着肿瘤细胞的粘附和能动性,它的激活可以破坏细胞外基质,促进肿瘤细胞的游离和迁移。因此CL在肿瘤的侵袭和转移中起着重要的作用。本研究以胃癌患者为研究对象,采用RT-PCR方法检测RASSF1A及CL mRNA在胃癌及正常胃粘膜中的表达,分析上述指标与胃癌临床生物学行为的关系,研究其在胃癌发生、发展及浸润转移过程中的作用。方法:选取河北医科大学第四医院外三科2008年6月-2008年12月胃癌手术切除标本共42例。分别采集胃癌和正常胃粘膜组织(距离肿瘤边缘5cm以上),均经术后病理证实。所有患者术前均未接受过放化疗或生物治疗等干预措施。采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)技术,检测胃癌及正常胃粘膜中RASSF1A和CL mRNA表达情况,分析二者表达情况与胃癌患者性别、年龄,肿瘤部位、大小、大体分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期等临床生物学行为的关系,并以GAPDH作为内参照标准。所有资料应用SPSS 16.0统计软件进行统计学分析,p <0.05具有统计学意义。结果:1胃癌组织RASSF1A mRNA的表达水平(0.42±0.27)明显低于其在正常胃粘膜(1.27±0.48)中的表达水平(p <0.01)。2胃癌组织CL mRNA的表达水平(2.39±0.46)明显高于其在正常胃粘膜(1.20±0.34)中的表达水平(p<0.01)。3胃癌组织RASSF1A mRNA在低分化组的表达水平(0.36±0.21)低于高、中分化组的表达水平(0.68±0.36),二者比较差异有显著性(p <0.05);在临床分期中III+IV期组的表达水平(0.35±0.18)低于I+II期组的表达水平(0.95±0.23),二者比较差异有显著性(p <0.01)。4胃癌组织CL mRNA在浸润深度T3+T4组的表达水平(2.47±0.44)高于T1+T2组的表达水平(1.91±0.27),二者比较差异有显著性(p <0.01);在有淋巴结转移组的表达水平(2.50±0.42)高于无淋巴结转移组的表达水平(2.17±0.48),二者比较差异有显著性(p <0.05);在临床分期中III+IV期组的表达水平(2.47±0.44)高于I+II期组的表达水平(1.86±0.25),二者比较差异有显著性(p <0.01)。5胃癌组织中RASSF1A mRNA的表达水平在患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、大体分型、浸润深度及淋巴转移分组中的差异无显著性(p >0.05)。6胃癌组织中CL的mRNA的表达水平在患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、大体分型及分化程度分组中的差异无显著性(p >0.05)。7胃癌组织中RASSF1A mRNA的表达水平降低,而CL mRNA的表达水平升高,二者存在一定的负相关(rs=-0.25),但无统计学意义(p >0.05)。结论:1 RASSF1A mRNA在胃癌组织中的表达水平明显低于正常胃黏膜组织,CL mRNA在胃癌组织中的表达水平明显高于正常胃黏膜组织。说明RASSF1A和CL参与了胃癌的发生。2胃癌组织RASSF1A mRNA的表达水平随着分化程度的降低、临床分期的增加而明显降低。RASSF1A mRNA的表达降低预示着胃癌恶性度高,临床分期晚。3胃癌组织中CL mRNA的表达水平随着浸润深度的加深、淋巴结的转移、临床分期的增加而明显升高。CL mRNA的表达升高说明胃癌侵袭转移能力增强,临床分期晚。4胃癌组织中RASSF1A mRNA的表达水平在患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、大体分型、浸润深度及淋巴转移分组中的差异无显著性。5胃癌组织中CL mRNA的表达水平在患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、大体分型及分化程度分组中的差异无显著性。6胃癌组织中RASSF1A及CL mRNA的表达水平有一定的负相关,但无统计学意义。