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研究背景和目的:正常细胞中,癌基因和抑癌基因处于一个稳定的平衡,当细胞受到外界致癌因子影响时,平衡被打破,导致癌基因被激活或抑癌基因失活,正常细胞有丝分裂周期调控失控、细胞增殖失控,细胞发生癌变。癌细胞处于恶性增殖状态,可通过检测细胞的增殖情况,从而判断细胞是否发生了恶变。PCNA、Ki-67是目前检测细胞增殖状态的主要的生物学因子。PCNA是一种36KD的酸性核蛋白,在静止细胞内几乎不表达,仅在具有分裂能力的细胞中阶段性表达。PCNA能辅助DNA聚合酶δ合成DNA,参与损伤DNA的修复合成,并且对细胞周期的调控具有一定的作用。Ki-67是另一种细胞增殖蛋白,与细胞的增殖密切相关,可以被当做识别正常细胞与肿瘤细胞的标志物,在周期性增殖细胞中表达。Ki-67在细胞分裂周期中阶段性表达,参与细胞周期的调控,与DNA、核糖体、核仁的合成密切相关。PCNA、Ki-67为细胞分裂周期中重要组成蛋白,对细胞周期的调控及促进起到积极作用。近年来研究表明,这两种蛋白能有效的反映细胞分裂状态,已广泛应用于肿瘤的良恶性诊断、评估肿瘤的发生、发展及预后等方面。目前对于胃癌诊断及预后评估的研究诸见报端,但是,经查证尚未有学者对胃癌组织进行PCNA和Ki-67联合检测的报道。本实验采用免疫组化SP方法,分别检测胃癌组织、癌前病变组织及正常胃组织中PCNA、Ki-67的表达情况,探讨两者与胃癌发生发展的联系及其影响机制,以及两者与CEA在胃癌中的相关性分析;同时探讨两者与胃癌细胞分化等级、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤部位、临床分期等临床特征的关系。方法:随机选取2017年1月至2017年12月在西南医科大学附属第一医院胃肠外科住院并行根治性手术的胃癌患者87例,所有患者均按照NCCN胃癌临床实践指南的标准诊断。患者术后癌组织及正常胃组织标本保存完好,住院病历资料及检验、病理资料完整可查。同时随机选取同期在西南医科大学附属第一医院内镜医学部行胃镜检查并经病理组织活检诊断为胃癌前病变的病理组织标本35例,所有患者经胃镜检查并经病理组织检查确诊为慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生或上皮内瘤变。通过免疫组织化学SP方法检测PCNA、Ki-67在胃癌组织、胃癌前病变组织及正常胃组织中的表达情况。同时查阅胃癌患者检验资料,了解患者术前血清CEA表达情况。实验所得数据采用SPSS19.0进行统计运算,计量资料采用t检验,计数资料采用卡方检验,应用Spearman进行相关性分析;MedCalc作ROC曲线分析特异度。结果:胃癌组织中,77例为PCNA阳性表达,10例为阴性表达,阳性率为88.51%;87例正常胃组织中,3例呈阳性表达,84例阴性表达,阳性表达率为3.45%;35例胃癌前病变组织切片中,17例呈阳性表达,18例为阴性表达,阳性率为48.57%;胃癌组织较胃癌前病变、正常胃组织中PCNA的表达具有显著性差异(χ~2=22.509、126.705 P<0.001),胃癌前病变组织中PCNA较正常胃组织具有显著性差异(χ~2=37.078 P<0.001)。胃癌组织中PCNA的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、分化等级等临床特征无显著性相关(χ~2=0.302、1.049、0.302、0.019 P=0.583、0.306、0.583、0.889);与肿瘤淋巴结转移、浸润深度、TNM分期显著性相关(χ~2=9.621、7.206、12.978 P=0.007、0.002、<0.001)。胃癌组中,75例为Ki-67阳性表达,12例为阴性表达,阳性率为86.21%;87例正常胃组织中,5例呈阳性表达,82例阴性表达,阳性表达率为5.75%;35例胃癌前病变组织切片中,14例呈阳性表达,21例为阴性表达,阳性率为40%;胃癌组织较胃前病变组织、正常胃组织中的Ki-67表达存在显著性差异(χ~2=27.006、113.378 P<0.001);胃癌前病变组织中Ki-67较正常胃组织具有显著性差异(χ~2=22.272 P<0.001)。胃癌组中Ki-67的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、分化程度等临床特征无显著相关(χ~2=0.125、0.554、0.989、2.071 P=0.724、0.457、0.320、0.150);与肿瘤淋巴结转移、浸润深度、TNM分期显著性相关(χ~2=11.853、8.046、13.749 P=0.001、0.005、<0.001)。根据ROC曲线分析,PCNA对胃癌诊断优于Ki-67。利用Spearman等级相关分析,胃癌组中PCNA和CEA的表达呈正相关性(r_s=0.682P<0.001)、Ki-67和CEA的表达呈正相关性(r_s=0.595 P<0.001);PCNA和Ki-67的表达呈正相关性(r_s=0.692 P<0.001)。结论:(1)PCNA、Ki-67在胃癌组织中过度表达,表明它们可能在胃癌的发生、发展过程中有重要的意义。(2)PCNA、Ki-67与胃癌浸润深度、淋巴结转移、TNM分期显著相关,提示它们可能与癌细胞侵袭、转移有关。(3)PCNA、Ki-67及CEA两两呈正相关性,三者联合检测可能对评估胃癌发生发展及预后具有一定的作用。