论文部分内容阅读
目的：通过观察TRPA1在加巴喷丁(gabapentin，GBP)治疗神经病理性疼痛大鼠模型背根神经节(DRG)中表达的变化及鞘内注射GBP后大鼠神经病理性疼痛行为学表现的变化和其对腰段脊髓炎性细胞因子表达的影响，探讨TRPA1在GBP治疗神经病理性疼痛中的作用，以及GBP其可能的作用机制。 方法：成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为为假手术组(Sham)、CCI组、NS+ CCI组、GBP10+ CCI组、GBP30+ CCI组及GBP100+ CCI组(n=8)。造模后14天，NS+CCI组给予生理盐水10μl，GBP10+CCI组、GBP30+CCI组及GBP100+CCI组分别鞘内注射加巴喷丁10μg/10μl、30μg/10μl、100μg/10μl。各组于术前1d、给药前1h、给药后2、4、6、8h分别测定机械缩足阈值(Mechanicalwithdrawl threshold MWT)和热缩足潜伏期(Thermal withdrawal latency TWL)。给药后9h取大鼠腰段脊髓，检测肿瘤坏死因子α(tumor hecrosing factorα，TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-6、IL-10的表达和腰段脊髓NF-κB的表达。同时，我们选取Sham组、CCI组、NS+CCI组以及GBP100+ CCI组，应用荧光定量PCR技术，观察TRPA1在脊髓背根神经节表达的改变。 结果： 一行为学表现 各组手术前1d的MWT与TWL差异无统计学意义（P＞0.05）。Sham组手术前后各时间点的MWT与TWL差异无统计学意义(P＞0.05)。与Sham组相比，CCI组、NS+CCI组、GBP10+CCI组、GBP30+CCI组以及GBP100+CCI组术后MWT与TWL均下降（P＜0.01）。与CCI组相比，GBP10+CCI组MWT与TWL在给药后2、4h，GBP30+CCI组在给药后2、4、6h，GBP100+CCI组在给药后2、4、6、8h，MWT与TWL上升(P＜0.05）。与GBP10+CCI组、GBP30+CCI组相比，GBP100+CCI组在给药后2、4、6、8h MWT与TWL均上升(P＜0.05）。 二 ELISA测定细胞因子 2.1腰段脊髓TNF-α、IL-6、IL-10表达与Sham组比，CCI组、NS+CCI组、GBP10+ CCI组、GBP30+CCI组及GBP100+CCI组的腰段脊髓TNF-α、IL-6及IL-10表达上升(P＜0.05)。与CCI组相比，GBP100+CCI组腰段脊髓TNF-α、IL-6表达下降，IL-10表达上升(P＜0.01); GBP30+CCI组腰段脊髓TNF-α、IL-6表达下降，IL-10表达上升(P＜0.05); GBP10+CCI组腰段脊髓TNF-α、IL-6、IL-10则无明显变化（P＞0.05）。 2.2腰段脊髓NF-κB的表达与Sham组比，CCI组、NS+ CCI组、GBP10+CCI组、GBP30+CCI组及GBP100+CCI组腰段脊髓NF-κB表达上升，差异有统计学意义（P＜0.01）。与CCI组相比，GBP30+CCI组及GBP100+CCI组脊髓NF-κB表达下降，差异有统计学意义(P＜0.05); GBP10+CCI组腰段脊髓NF-κB表达无明显变化(P＞0.05）。 三荧光定量PCR 与Sham组比，CCI组、NS+CCI组及GBP100+CCI组TRPA1表达上升，差异有统计学意义(P＜0.05)。与CCI组相比，GBP100+CCI组TRPA1表达下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。CCI组与NS+CCI组相比，表达无明显变化（P＞0.05）。 结论： 一、加巴喷丁可有效治疗大鼠CCI后神经病理性疼痛，其镇痛机制可能与降低脊髓NF-κB表达，抑制脊髓TNF-α及IL-6表达，增强IL-10表达相关。 二、确定神经病理性疼痛模型建立成功。神经病理性疼痛条件下，背根神经节TRPA1表达增多，并与神经病理性疼痛行为时相一致，提示加巴喷丁可能是通过TRPA1受体对神经病理性疼痛的调控中发挥重要作用。