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目的通过研究失荅剌知丸对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠干预后其神经功能缺损的恢复及海马区MAPK-ERK信号通路ERK2的表达,探讨该方抗脑缺血再灌注损伤大鼠海马区神经细胞凋亡的作用机制。方法将238只SPF清洁级SD雄性大鼠,随机分为17组,每组14只,组别为:空白组、假手术组、模型组、尼莫地平组、失荅剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组。其中针对模型组和各药物组制备大鼠脑缺血再灌注的模型,并按照不同药物和给药时间将此四组分别进一步细化为1d、3d、7d三个亚组。除空白组、假手术组、模型组用生理盐水灌胃之外,其余各药物组均用相应的制剂,浓度分别是尼莫地平组1.08g/L,失荅剌知丸低剂量组1.5g/mL、中剂量组3.0g/mL、高剂量组4.5g/mL,每日同一时间段灌胃两次,在末次灌胃后,参考Garcia JH评分法对大鼠进行神经功能缺损评分。之后以上述的1d、3d、7d三个时间点做样本采集,通过原位末端标记法(TUNEL)、免疫荧光法、蛋白免疫印迹实验(Western Blot)以及逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)来检测并观察样本中海马区MAPK-ERK信号通路ERK2的表达。结果1.大鼠神经功能评分:(1)模型组对比于假手术组,大鼠神经功能评分降低(P<0.01);而各药物组分别对比于模型组,其评分均升高(P<0.05或P<0.01);(2)在各个药物组中,失荅剌知丸高剂量组分别与其他组比较,大鼠神经功能评分均升高(P<0.05或P<0.01),且差异性显著;(3)大鼠神经功能缺损恢复程度评分随着1 d、3 d、7 d时间的逐渐延长而依次呈上升趋势且与延长时间成正比。2.脑组织TUNEL结果:(1)模型组对比于假手术组,细胞凋亡数量增多(P<0.01);而各药物组分别对比于模型组,其数量均减少(P<0.05或P<0.01);(2)在各个药物组中,失荅剌知丸高剂量组分别与其他组比较,细胞凋亡数量均减少(P<0.05或P<0.01),且差异性显著;(3)细胞凋亡数量随着1 d、3 d、7 d时间的逐渐延长而依次呈下降趋势且与延长时间成反比。3.ERK2免疫荧光结果:(1)模型组对比于假手术组,ERK2表达升高(P<0.01);而各药物组分别对比于模型组,其表达均升高(P<0.05或P<0.01);(2)在各个药物组中,失荅剌知丸高剂量组分别与其他组比较,ERK2表达均升高(P<0.05或P<0.01),且差异性显著。(3)ERK2的表达量随着1 d、3 d、7 d时间的逐渐延长而依次呈上升趋势且与延长时间成正比。4.ERK2 Western Blot结果:(1)模型组对比于假手术组,ERK2表达升高(P<0.01);而各药物组分别对比于模型组,其表达均升高(P<0.05或P<0.01);(2)在各个药物组中,失荅剌知丸高剂量组分别与其他组比较,ERK2表达均升高(P<0.05或P<0.01),且差异性显著。(3)ERK2的表达量随着1 d、3 d、7 d时间的逐渐延长而依次呈上升趋势且与延长时间成正比。5.ERK2 RT-PCR结果:(1)模型组对比于假手术组,ERK2表达升高(P<0.01);而各药物组分别对比于模型组,其表达均升高(P<0.05或P<0.01);(2)在各个药物组中,失荅剌知丸高剂量组分别与其他组比较,ERK2表达升高(P<0.05或P<0.01),且差异性显著。(3)ERK2的表达量随着1 d、3 d、7 d时间的逐渐延长而依次呈上升趋势且与延长时间成正比。结论1.失荅剌知丸对大鼠神经功能的缺损能够起到修复作用。2.失荅剌知丸能够抑制局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的细胞凋亡,这可能与调节MAPK-ERK信号通路ERK2表达水平有关。