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食管癌是人类恶性肿瘤之一,中国作为食管癌的高发区,其食管癌的组织病理学类型绝大多数是食管鳞状细胞癌,并存在预后效果差、生存率低的问题,由于缺乏较好的治疗方法,基因水平的治疗已经成为研究热点。P53是一种重要的抑癌基因,它在控制细胞生长和失活中起到很重要的作用,P53被誉为恶性肿瘤的标志,在约50%的人类肿瘤中存在突变,且主要发生在DNA结合区,从而使其不能发挥正常的功能。目前已经发现许多P53基因突变位点,包含多个“hot spot"位点,并已经证明这些位点突变后使得P53失去肿瘤抑制的功能或者增加癌基因的功能如促进细胞增殖、诱导血管生成、增加耐药性及促进细胞侵袭转移能力等。本研究根据实验室前期全基因组测序结果发现在食管鳞癌临床样本中P53的DNA结合区有新的位点突变,我们选择其中突变率高且没有被报道过的两个位点即p53G113c和p53R141H,在食管鳞癌细胞系及P53缺失的细胞系中进行验证,首先通过MTS及克隆形成实验发现P53这两个新位点突变可以促进细胞的生长和增殖,之后又采用流式细胞技术检测P53突变后对细胞凋亡及周期的影响,发现突变后可以抑制UV诱导的细胞凋亡并可以减弱P53介导的细胞周期阻滞作用,我们又通过transwell实验检测到P53突变后是可以促进细胞侵袭迁移的。综上所述,P53的这两个位点突变后使野生型P53增加一些癌基因的功能如促进细胞生长、抑制细胞凋亡、减弱P53介导的细胞周期阻滞、促进细胞侵袭迁移,因此是具有促癌功能的。真核生物3,非翻译区(3’untranslated regions,3’UTR)的差异表达在细胞分化、生长发育、增殖凋亡及肿瘤发生发展过程中发挥着巨大的作用,已经越来越多的引起研究人员的关注,3’UTR既可以与相应的miRNAs结合抑制靶基因的表达,也可以作为独立的RNA分子调控靶基因的表达和相应的生物学活性,并且其差异表达能发挥着癌基因或抑癌基因的功能。CAPZA1是F-actin加帽蛋白α亚基中的一个成员,目前已经有文献报道它在多种肿瘤中异常表达,但并没有关于CAPZA13’UTR的高表达对肿瘤发生发展的影响的研究,本论文根据实验室前期全基因组测序结果发现在食管鳞癌病人组织中CAPZA13’UTR存在异常过表达,我们通过构建过表达质粒在细胞系中进行功能的验证,首先利用MTS及克隆形成实验发现3,UTR高表达可以促进细胞生长和增殖,然后又采用流式细胞技术检测3’UTR高表达后对细胞凋亡的影响,发现可以抑制细胞凋亡,之后通过transwell实验检测到3,UTR高表达可以促进细胞侵袭转移能力。综上所述,CAPZA13’UTR高表达可以促进食管癌细胞生长增殖、抑制细胞凋亡、促进细胞侵袭能力,这提示CAPZAl的3,UTR可能作为一种独立的RNA分子发挥作用,且其高表达具有促癌的功能。