雌马酚对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用及其机制研究

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[目的]观察雌马酚对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用,并探讨其分子机制。[方法]用不同浓度雌马酚(10-7mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L、5×10-6mol/L、10-5mol/L)和雌二醇(10-9mol/L)分别处理人乳腺癌细胞MCF-7和人正常乳腺细胞MCF-10A,并用显微镜观察细胞形态变化、MTT法测定细胞数量和增殖率、流式细胞仪测定细胞凋亡率和周期、体外划痕实验测定细胞迁移能力、蛋白质免疫印迹技术检测(bag-1、bcl-2、VEGF、ERK1/2、磷酸化ERK1/2、p38、磷酸化p38)蛋白的表达水平,从分子水平上了解雌马酚对MCF-7细胞增殖的抑制作用及其分子机制。[结果]雌二醇可以促进MCF-7细胞增殖,MCF-7细胞增殖率和细胞数量随着雌马酚浓度的升高和作用时间增加而下降。雌马酚对MCF-10A细胞无明显影响。与对照组相比,雌马酚组MCF-7细胞凋亡率明显增加,并将细胞周期阻滞于GoG1期。细胞迁移能力随雌马酚浓度升高而降低。雌二醇可以上调抗凋亡蛋白bag-1、bcl-2以及细胞生长因子VEGF蛋白表达量,随着浓度不断升高,雌马酚对bag-1、bcl-2、VEGF蛋白表达的抑制作用越发明显,当雌马酚浓度达到10-5mol/L时,bag-1、bcl-2、VEGF蛋白的表达量与对照组相比最低。雌二醇对总ERK1/2和总p38的表达无影响,可上调p-ERK1/2和p-p38蛋白表达量;雌马酚对总ERK1/2和总p38蛋白表达无影响;随着雌马酚浓度不断升高p-ERK1/2和p-p38蛋白表达降低。[结论]1.雌马酚能够显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,在10-7mol/L-10-5mol/L剂量范围内呈时间和剂量效应趋势。2.雌马酚对MCF-7细胞的增殖抑制作用可能通过促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于GoG1期,下调bag-1、bcl-2、VEGF蛋白以及p-ERK1/2和p-p38蛋白表达来实现。3.研究提示,雌马酚可能具有防治雌激素受体阳性乳腺癌的作用。
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